Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）過程①和②必需用到的酶有____________ 、______________ 。

（2）重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有_____________才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體（寫出一點(diǎn)即可）。

（3）檢測(cè)到_________________說明轉(zhuǎn)基因克隆豬已經(jīng)成功。水母的基因能夠在小豬體內(nèi)成功表達(dá)的原因是_____________________________________。

（4）綠色熒光蛋白基因所控制的遺傳特性，能在轉(zhuǎn)基因克隆豬親子代中，穩(wěn)定維持和表達(dá)最關(guān)鍵的是__________________________________。

（5）圖示過程中運(yùn)用到的生物工程技術(shù)有________________________________（至少寫出3個(gè)）。

（二）胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）介導(dǎo)法是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培育的途徑之一，請(qǐng)據(jù)下圖某轉(zhuǎn)基因老鼠的培育流程回答相關(guān)問題：

（1）胚胎干細(xì)胞是由早期胚胎中分離出來的一類細(xì)胞，在形態(tài)上，表現(xiàn)為_________（至少寫出2點(diǎn)），在體外培養(yǎng)的條件下具有__________的特點(diǎn)。

（2）將修飾后的外源基因?qū)��?/span>ES細(xì)胞常采用的方法是__________；培養(yǎng)過程中，ES細(xì)胞所需的氣體主要有02和C02，其中02是__________，C02用來維持培養(yǎng)液的PH值。

（3）為檢測(cè)ES細(xì)胞的染色體上是否含有外源基因，在分子水平上可采用的方法是__________；圖中④過程中要將含外源基因的ES細(xì)胞導(dǎo)入囊胚的__________。將得到的重組胚胎導(dǎo)入⑤體內(nèi)，其存活的基礎(chǔ)是__________。

Answer 1

【答案】限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn) 克隆豬體內(nèi)含有綠色熒光蛋白 不同生物共用一套遺傳密碼子 綠色熒光蛋白基因整合到轉(zhuǎn)基因克隆豬染色體DNA上 轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù) 細(xì)胞體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯 可以增殖而不發(fā)生分化 顯微注射法（技術(shù)） 細(xì)胞代謝必需的或用于細(xì)胞需氧呼吸 DNA分子雜交 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 受體子宮對(duì)外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

【解析】

（一）據(jù)圖分析，①表示獲取綠色熒光蛋白基因，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④表示取供體細(xì)胞的細(xì)胞核，⑤表示去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，⑥表示核移植，⑦表示早期胚胎的培養(yǎng)，⑧表示胚胎移植。

（二）分析圖示：圖為胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的流程，其中①表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；②③表示培養(yǎng)篩選克隆細(xì)胞過程；④表示將轉(zhuǎn)基因的胚胎干細(xì)胞注射到受體動(dòng)物胚胎；⑤表示胚胎移植過程；⑥表示形成嵌合體。

（一）（1）①過程表示獲取目的基因，必需用到限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要用限制性核酸內(nèi)切酶切出黏性末端，并用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA。
（2）重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體。
（3）轉(zhuǎn)基因克隆豬已經(jīng)成功，說明已經(jīng)在克隆豬體內(nèi)檢測(cè)到綠色熒光蛋白，水母的基因能夠在小豬體內(nèi)成功表達(dá)的原因是不同生物共用一套遺傳密碼子。
（4）綠色熒光蛋白基因所控制的遺傳特性，能在轉(zhuǎn)基因克隆豬親子代中，穩(wěn)定維持和表達(dá)最關(guān)鍵的是綠色熒光蛋白基因整合到轉(zhuǎn)基因克隆豬染色體DNA上。
（5）圖示過程中運(yùn)用到的生物工程技術(shù)有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)。

（二）（1）胚胎干細(xì)胞是由早期胚胎中分離出來的一類細(xì)胞，在形態(tài)上，表現(xiàn)為細(xì)胞體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯，在體外培養(yǎng)的條件下具有可以增殖而不發(fā)生分化的特點(diǎn)。
（2）將修飾后的外源基因?qū)�入ES細(xì)胞常采用的方法是顯微注射法；培養(yǎng)過程中，ES細(xì)胞所需的氣體主要有O2和CO2，其中O2是細(xì)胞代謝所必需的或用于細(xì)胞需氧呼吸，CO2用來維持培養(yǎng)液的PH值。
（3）為檢測(cè)ES細(xì)胞的染色體上是否含有外源基因，在分子水平上可采用的方法是DNA分子雜交；圖中④過程中要將含外源基因的ES細(xì)胞導(dǎo)入囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。將得到的重組胚胎導(dǎo)入⑤體內(nèi)，其存活的基礎(chǔ)是受體子宮對(duì)外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。