某研究性學習小組利用熒光素-熒光素酶生物發(fā)光法,測定人參愈傷組織中ATP的含量,以研究人參細胞能量代謝的特點.
實驗原理:熒光素在熒光素酶、ATP等物質(zhì)參與下,進行反應發(fā)出熒光;用分光光度計可測定發(fā)光強度;當熒光素和熒光素酶都足量時,在一定范圍內(nèi),ATP的含量與發(fā)光強度成正相關(guān).
實驗步驟:
一、ATP的提。悍Q取一定量的人參愈傷組織,研磨后沸水浴10min,冷卻至室溫,離心,取上清液.
二、ATP的測定:吸取一定量的上清液,放入分光光度計反應室內(nèi),并注入適量的所需物質(zhì),在有氧等適宜條件下進行反應,記錄發(fā)光強度并計算ATP含量.
請回答:
(1)步驟一中的沸水浴處理,使酶的
被破壞而失活.
(2)步驟二注入的物質(zhì)中,屬于反應物的是
.分光光度計反應室內(nèi)能量的轉(zhuǎn)換形式是
.
(3)熒光素酶價格昂貴,為能準確測定出ATP的含量,又能節(jié)省酶的用量,學習小組探究了“測定ATP時所需熒光素酶溶液的最佳濃度”,實驗結(jié)果如圖.
①學習小組配制了1×10
-8mol/L ATP標準液、
和70mg/L的熒光素溶液(過量)溶液進行實驗.
②結(jié)果表明:
圖中
點所對應的熒光素酶濃度為最佳濃度.
圖中e、f、g點所對應的熒光素酶濃度不同,但發(fā)光強度相同,這是因為
.
(4)ATP測定對食品衛(wèi)生監(jiān)控有重要意義.食品衛(wèi)生檢驗人員利用上述生物發(fā)光法測定某熟食品樣品中細菌的ATP總含量,測算出了細菌的數(shù)量,從而判斷食品污染程度.做出上述判斷的理由是:每個細菌細胞中ATP的含量
.
(5)下列生理過程中,不消耗ATP的一組是
A.蛋白質(zhì)的合成和加工 B.染色體的復制和運動
C.胰島素的分泌 D.質(zhì)壁分離和復原.