Question

12．利用基因工程的技術(shù)手段可以生產(chǎn)抗性植株．在研究并大面積種植只含一種抗蟲基因的轉(zhuǎn)基因甘藍(lán)以后，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，小菜蛾種群對(duì)該種甘藍(lán)產(chǎn)生的毒蛋白具有更強(qiáng)的抗性．
（1）基因工程技術(shù)手段的核心是構(gòu)建目的基因表達(dá)載體，與雜交育種相比基因工程的優(yōu)點(diǎn)在于克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙．在供體細(xì)胞中提取目的基因需要用到限制酶，此酶的作用特點(diǎn)是識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的位點(diǎn)切割．
（2）抗蟲基因能在甘藍(lán)植株內(nèi)成功表達(dá)是因?yàn)楣灿靡惶走z傳密碼子，檢測(cè)A基因和B基因在細(xì)胞中是否得到轉(zhuǎn)錄可采用分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否翻譯可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（3）用基因工程的手段獲得含有抗性基因的甘藍(lán)細(xì)胞，運(yùn)用的原理是基因重組，甘藍(lán)細(xì)胞培育成抗性植株運(yùn)用的技術(shù)手段稱為植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性．
（4）將抗性基因?qū)�入甘藍(lán)細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是構(gòu)建目的基因表達(dá)載體．在供體細(xì)胞中提取目的基因需要用到限制性核酸內(nèi)切酶；限制酶具有特異性，即識(shí)別特定的堿基序列，并在特定的位點(diǎn)切割．
（2）由于自然界所有生物共有一套遺傳密碼子，所以一種生物的基因能在另一種生物體內(nèi)表達(dá)．檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否得到轉(zhuǎn)錄可采用分子雜交法．檢測(cè)目的基因是否翻譯可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（3）用基因工程的手段獲得含有抗性基因的甘藍(lán)細(xì)胞，運(yùn)用的原理是基因重組，甘藍(lán)細(xì)胞培育成抗性植株運(yùn)用的技術(shù)手段稱為植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性．
（4）由于甘藍(lán)細(xì)胞是植物細(xì)胞，所以將抗性基因?qū)�入甘藍(lán)細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．
故答案為：
（1）構(gòu)建目的基因表達(dá)載體     遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙   限制   識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定的位點(diǎn)切割
（2）共用一套遺傳密碼子   分子雜交    抗原-抗體雜交
（3）基因重組    植物組織培養(yǎng)技術(shù)   植物細(xì)胞的全能性   
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需用注意的細(xì)節(jié)問題，并能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．