Question

【題目】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：

（1）在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需兩次用到胰蛋白酶，第一次使用的目的是將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，此次的胰蛋白酶也可用____________酶代替。由于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)具有____________、____________現(xiàn)象，因此需第二次用該酶處理，然后分瓶培養(yǎng)。在培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，目的是________________________。

（2）目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為____________代以內(nèi)的細(xì)胞，以保持細(xì)胞正常的____________核型。

（3）在單克隆抗體制備過(guò)程中，將獲得__________________________（答出兩個(gè)特點(diǎn)）的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行____________培養(yǎng)和抗體檢測(cè)以后，再經(jīng)過(guò)多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。利用滅活的病毒可以誘導(dǎo)產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，其中的滅活是指____________________________________。

Answer 1

【答案】膠原蛋白??? 貼壁生長(zhǎng)??? 接觸抑制??? 清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害??? 10??? 二倍體??? 既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無(wú)限增殖??? 克隆化??? 利用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)???

【解析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：

1、當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂，此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理；

2、單克隆抗體的制備：①制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞；②獲得雜交瘤細(xì)胞；③克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；④將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；⑤提取單克隆抗體。

（1）在培養(yǎng)瓶中進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，第一次使用胰蛋白酶的目的是將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，此次的胰蛋白酶也可用膠原蛋白酶代替。由于正常動(dòng)物細(xì)胞具有貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的特點(diǎn)，故培養(yǎng)到一定階段需要第二次用胰蛋白酶處理，然后分瓶培養(yǎng)。在培養(yǎng)過(guò)程中，常要清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，故需要定期更換培養(yǎng)液。

（2）目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)的細(xì)胞，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。

（3）在單克隆抗體制備過(guò)程中，將獲得既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)以后，再經(jīng)過(guò)多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，將這些細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液和小鼠腹水中就可獲得大量的單克隆抗體。滅活是指利用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)