Question

9．高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性．研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖所示．請回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)采用無菌技術(shù)，防止培養(yǎng)物被微生物污染及操作者被微生物感染，操作者的雙手需要進(jìn)行清潔和消毒處理．
（2）Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是先調(diào)pH，后滅菌．
（3）Ⅰ號培養(yǎng)基中的碳源為淀粉．若Ⅰ號培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（或稀釋不夠）．
（4）部分嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈，應(yīng)挑出透明圈大（填“大”或“小”）的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基，該過程的目的是純化目的菌；②過程所使用的接種方法是平板劃線 法．
（5）從Ⅰ號培養(yǎng)基接種到Ⅱ號時(shí)，下次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種來于上次劃線的末端．

Answer 1

分析 分析題圖：①過程是梯度稀釋，②過程是稀釋涂布平板法接種，目的是篩選單菌落．從功能上看，Ⅰ號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基．

解答 解：（1）實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)采用無菌技術(shù)，防止培養(yǎng)物被微生物污染及操作者被微生物感染，操作者的雙手需要進(jìn)行清潔和消毒處理．
（2）培養(yǎng)基制作完成后要先調(diào)節(jié)pH，再滅菌．
（3）該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選耐高溫的淀粉分解菌，需要使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．用稀釋涂布平板法接種前需要對菌液進(jìn)行梯度稀釋，如果培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（或稀釋不夠）．
（4）嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈越大，說明嗜熱菌產(chǎn)生高溫淀粉酶的效率越高，因此應(yīng)挑出透明圈大的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基，該過程的目的是純化目的菌；由圖可知，②過程所使用的接種方法是平板劃線法．
（5）接種時(shí)下次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種來源于上次劃線的末端．
故答案為：
（1）消毒   
（2）先調(diào)節(jié)pH，后滅菌    
（3）淀粉    菌液濃度過高（或稀釋不夠）
（4）大      純化      平板劃線
（5）上次劃線的末端

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術(shù)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)；識記接種微生物常用的兩種方法；識記培養(yǎng)基的制備過程，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．