研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑-內(nèi)皮抑素，它能有效地抑制血管增生．下面是通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得內(nèi)皮抑素的方法，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：
（1）從肝細(xì)胞中分離出RNA，經(jīng)
 
過(guò)程獲得cDNA，再通過(guò)
 
擴(kuò)增內(nèi)皮抑素基因．
（2）擴(kuò)增的目的基因與PUC18質(zhì)粒（如圖所示）都用EcoRI和BamHI進(jìn)行雙酶切，然后用DNA連接酶進(jìn)行連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒．雙酶切避免了目的基因與載體間的
 
連接，提高了重組質(zhì)粒的比例．
（3）大腸桿菌pUC18質(zhì)粒上的LacZ基因可表達(dá)出B-半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時(shí)，X-gal便會(huì)被B-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落；反之，則形成白色菌落．由此推知，選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入
 
物質(zhì)．成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成
 
色的菌落，原因是
 
．
（4）從選擇培養(yǎng)基中挑取所需的單個(gè)菌落接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得粗提表達(dá)產(chǎn)物．將等量毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板，37℃培養(yǎng)．將等量不同濃度的粗提表達(dá)產(chǎn)物加進(jìn)培養(yǎng)孔中，72h后在顯微鏡下觀察細(xì)胞存活情況并
 
，實(shí)驗(yàn)結(jié)果 如表所示．結(jié)果說(shuō)明
 
．
粗提表達(dá)產(chǎn)物濃度（μg/ml） 0 2 4 6 8 10
活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目（x100） 12 6 2 1 0.5 0.5
考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用
專題：
分析：此題考查了基因工程技術(shù)，目的基因的獲得方法有三種：從基因文庫(kù)中獲取、PCR技術(shù)擴(kuò)增、人工合成法；基因表達(dá)載體中的LacZ基因被插入滅活．據(jù)此解題．
解答： 解：（1）從肝細(xì)胞中分離出相應(yīng)的RNA，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄（或逆轉(zhuǎn)錄）獲得內(nèi)皮抑素基因，再利用PCR技術(shù)進(jìn)行體外擴(kuò)增，以獲得更多的目的基因．
（2）雙酶切后，目的基因兩端的黏性末端不同，被切開(kāi)的運(yùn)載體兩端的黏性末端也不同，這樣可以避免目的基因與載體反向連接，還能減少目的基因與目的基因、載體與載體的連接，提高了重組質(zhì)粒的比例．
（3）大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒(méi)有插入外源基因，LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí)，Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落．反之，則形成白色菌落．選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入的物質(zhì)有IPTG、X-gal和氨芐青霉素．因?yàn)橹亟M質(zhì)粒的LacZ基因中插入了目的基因，使LacZ基因不能表達(dá)出β-半乳糖苷酶，所以成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成白色菌落．
（4）由表中數(shù)據(jù)可知，粗提表達(dá)產(chǎn)物濃度越高，活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目越少，說(shuō)明重組內(nèi)皮抑素（或粗提表達(dá)產(chǎn)物）能夠抑制毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖．
故答案為：（1）反轉(zhuǎn)錄   PCR （2）反向  
（3）IPTG、X-gal和氨芐青霉素   白    重組質(zhì)粒上的LacZ基因已被破壞而不能表達(dá)
（4）對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)   內(nèi)皮抑素能有效地抑制血管增生
點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的理解應(yīng)用能力和信息轉(zhuǎn)化能力，屬于中等難度題．
練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是（　　）
A、觀察植物細(xì)胞有絲分裂時(shí)，處于各時(shí)期的細(xì)胞不會(huì)出現(xiàn)在同一視野中
B、用淀粉、蔗糖酶和淀粉酶探究酶專一性時(shí)，可用碘液代替斐林試劑進(jìn)行鑒定
C、用低倍鏡觀察不到紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原的過(guò)程
D、用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，需將NaOH溶液和CuSO4溶液混勻后使用

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

胰腺合成的胰蛋白酶原進(jìn)入小腸后，在腸激酶作用下形成有活性的胰蛋白酶，該激活過(guò)程如圖所示（圖中數(shù)據(jù)表示氨基酸位置），下列分析不正確的是（　�。�
A、胰蛋白酶比胰蛋白酶原少了5個(gè)肽鍵
B、胰蛋白酶與胰蛋白酶原空間結(jié)構(gòu)不同
C、腸激酶與限制酶具有相似的作用特性
D、激活過(guò)程可避免胰蛋白酶破壞自身細(xì)胞

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

如圖所示生命活動(dòng)過(guò)程示意圖，正確的是（　�。�
A、
B、
C、
D、

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

回答下列與實(shí)驗(yàn)探究相關(guān)的問(wèn)題．
I．為了驗(yàn)證某大豆品種的矮化特性與赤霉素的含量有關(guān)，請(qǐng)用所給的實(shí)驗(yàn)材料，完成下列實(shí)驗(yàn)步驟并回答下列問(wèn)題：
實(shí)驗(yàn)材料：具2片真葉且長(zhǎng)勢(shì)相同的該品種大豆幼苗若干、完全培養(yǎng)液、蒸餾水、適宜濃度的赤霉素溶液，噴壺等．
（1）實(shí)驗(yàn)步驟：
①將上述大豆幼苗平均分成A、B兩組，A組為對(duì)照組：B組為實(shí)驗(yàn)組，分別置于等量的完全培養(yǎng)液中培養(yǎng)．
②用噴壺分別將
 
和
 
噴灑在A、B兩組幼苗上．
③將兩組苗置于相同且適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后，測(cè)定兩組植株的
 
．
（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：A組植株的平均高度小于B組植株平均高度．
（3）如果A、B兩組各選用1株幼苗進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，理由是
 
．
Ⅱ．轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以使某基因在植物體內(nèi)過(guò)量表達(dá)，也可以抑制某基因表達(dá)．假設(shè)A基因通過(guò)控制赤霉素的合成來(lái)控制大豆的株高，請(qǐng)完成如下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以驗(yàn)證假設(shè)是否成立．
（1）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：（借助轉(zhuǎn)基因技術(shù)，但不要求轉(zhuǎn)基因的具體步驟）
a．分別測(cè)定正常與矮生植株的赤霉素含量和株高．
b．通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)，一是抑制正常植株A基因的表達(dá)，二是
 
．
c．測(cè)定兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組植株
 
．
（2）支持上述假設(shè)的預(yù)期結(jié)果：
①與正常植株對(duì)照，A基因表達(dá)被抑制后，
 
．
②與矮生植物對(duì)照，
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

現(xiàn)代生物科技專題：下圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程，請(qǐng)據(jù)圖回答．

（1）質(zhì)粒上標(biāo)記基因的作用是
 
．
（2）過(guò)程①是
 
，這是基因工程的核心步驟，其目的是
 
．
（3）過(guò)程②采用最多的方法是
 
，檢測(cè)抗蟲(chóng)基因是否整合到棉花細(xì)胞DNA分子上的方法是
 
．
（4）③過(guò)程的培養(yǎng)基除含有必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂外，還需要添加
 
，④過(guò)程的實(shí)質(zhì)是
 
．
（5）經(jīng)檢測(cè)抗蟲(chóng)棉細(xì)胞染色體上含有一個(gè)抗蟲(chóng)基因，該植株自交得到Fl，其中全部的抗蟲(chóng)植株再自交一次，后代中抗蟲(chóng)植株占總數(shù)的
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

景天科植物A有一種很特殊的C02同化方式，圖甲所示為夜間氣孔開(kāi)放，吸收的C02生成蘋(píng)果酸儲(chǔ)存在液泡中；圖乙所示為白天氣孔關(guān)閉，液泡中的蘋(píng)果酸經(jīng)脫羧作用釋放C02用于光合作用；圖丙則表示十字花科植物B的
C02同化過(guò)程．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）植物A氣孔開(kāi)閉的特點(diǎn)，與其生活的環(huán)境是相適應(yīng)的，推測(cè)植物A生活的環(huán)境最可能是
 
．其白天進(jìn)行光合作用所需的C02的產(chǎn)生來(lái)源有
 

（2）在上午10：00點(diǎn)時(shí)，突然降低環(huán)境中C02濃度后的一小段時(shí)間內(nèi)，植物A和植物B細(xì)胞中C3含量變化的分別是
 
．
（3）圖戊為利用圖丁實(shí)驗(yàn)裝置測(cè)得植物B葉片在不同光照強(qiáng)度下某種氣體體積變化曲線圖．
本實(shí)驗(yàn)所測(cè)量的氣體是
 
，當(dāng)給予新鮮綠葉4klx的光照時(shí)，紅色液滴應(yīng)該向
 
移動(dòng)．影響圖戊曲線P點(diǎn)上下移動(dòng)的主要外界因素是
 
．光照強(qiáng)度為8klx時(shí)，葉片1小時(shí)光合作用產(chǎn)生的氣體量為
 
毫升（假設(shè)隨光照強(qiáng)度的增強(qiáng)而溫度不變）．

（4）某研究小組測(cè)定某地區(qū)植物B葉片中葉綠素含量，結(jié)果見(jiàn)下表．（葉綠素通常和蛋白質(zhì)結(jié)合成為結(jié)合型葉綠素．在某些環(huán)境因素影響下，部分結(jié)合型葉綠素與蛋白質(zhì)分離，成為游離型葉綠素．）
采樣日期
（月-日）		 某地區(qū)植物B葉片中葉綠素含量（mg/g）
總量 游離型 結(jié)合型
7-1 2.34 0.11 2.23
8-1 2.30 0.12 2.18
9-1 1.92 0.21 1.71
10-1 1.58 0.29 1.29
11-1 1.21 0.41 0.81
從表中數(shù)據(jù)分析，導(dǎo)致植物B葉片光合速率下降的主要原因是
 
，為提取葉片中的葉綠素，研磨前在研缽中除加入剪碎的葉片外，還應(yīng)加入
 
．經(jīng)快速研磨、過(guò)濾，將濾液收集到試管中，塞上橡皮塞；將試管置于適當(dāng)?shù)墓庹障?～3min后，試管內(nèi)的氧含量
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

（選修模塊1：生物技術(shù)實(shí)踐）
請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)的問(wèn)題：
（1）植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、
 
和
 
．
（2）芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于
 
，易溶于
 
，因此可用
 
作為提取劑來(lái)提取芳香油．
（3）橘子果實(shí)含有芳香油，通�？捎�
 
作為材料提取芳香油，而且提取時(shí)往往選用新鮮的材料，理由是
 
．
（4）對(duì)材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是
 
．
（5）得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時(shí)間后，芳香油將分布于液體的
 
層，原因是
 
．加入氯化鈉的作用是
 
．
（6）從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無(wú)水硫酸鈉，此試劑的作用是
 
．

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

如圖表示反射弧和神經(jīng)纖維局部放大的示意圖，下列說(shuō)法正確的是（　　）
A、在甲圖中，①所示的結(jié)構(gòu)屬于反射弧的效應(yīng)器
B、甲圖的③結(jié)構(gòu)中，信號(hào)的轉(zhuǎn)換模式為電信號(hào)→化學(xué)信號(hào)→電信號(hào)
C、若乙圖表示在興奮傳導(dǎo)過(guò)程中瞬間膜內(nèi)外電荷的分布情況，則a、c為興奮部位
D、興奮部位和相鄰的未興奮部位間，局部電流的方向與興奮傳導(dǎo)方向一致

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同步練習(xí)冊(cè)答案