Question

2．某種工業(yè)生產(chǎn)中會(huì)產(chǎn)生一些含碳有機(jī)廢水（含氮量極少），某細(xì)菌X在該種生物處理廢水中能發(fā)揮很大作用，現(xiàn)要對(duì)其進(jìn)行篩選．

培養(yǎng)液	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4•7H2O	KCl	NiSO4
A	-	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L
B	3g/L	3g/L	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L
C	3g/L	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L

（1）應(yīng)選用上表中的C（填圖中字母）培養(yǎng)液，解釋不選用其他培養(yǎng)液的原因：①A培養(yǎng)基中缺乏氮源，②B培養(yǎng)基中含有機(jī)廢水以外的碳源．
（2）接種前培養(yǎng)基必須進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，為確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可設(shè)置不加入廢水（或未接種或加入等量無(wú)菌水）的培養(yǎng)基為對(duì)照組；若要制作平板，常在培養(yǎng)液中加入瓊脂作為凝固劑．對(duì)獲得的目的菌種，可采用甘油管藏法，長(zhǎng)期保存．
（3）為獲得單個(gè)菌落，某同學(xué)將細(xì)菌X接種到正確的培養(yǎng)基中，經(jīng)培養(yǎng)后，其中一個(gè)平板的菌落分布如圖所示，該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法，所用的主要接種工具是涂布器，該同學(xué)可能的操作失誤是涂布不均勻．
（4）對(duì)細(xì)菌X計(jì)數(shù)時(shí)，可吸取菌液1mL稀釋1000倍，然后吸取稀釋后的菌液0.2mL，接種于平板上培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察到三個(gè)平板上的菌落數(shù)為61、62、63，則該菌液中的細(xì)菌X數(shù)量約為3.1×10⁵個(gè)/mL．

Answer 1

分析 篩選和分離微生物的一般步驟是：樣品取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．在此過(guò)程中通常需要使用選擇培養(yǎng)基．篩選和分離污水中的細(xì)菌X需要使用以污水為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基

解答 解：（1）據(jù)表分析，A培養(yǎng)基中缺乏氮源，B培養(yǎng)基中含有機(jī)廢水以外的碳源，所以不能篩選細(xì)菌X，而培養(yǎng)基C是以污水為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，所以可以使用C培養(yǎng)基篩選X細(xì)菌．
（2）培養(yǎng)基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌；為確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可設(shè)置不加入廢水（或加入等量蒸餾水）空白培養(yǎng)基為對(duì)照組；固體培養(yǎng)基制作時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入瓊脂作為凝固劑．菌種的長(zhǎng)期保存需要使用甘油管藏法．
（3）據(jù)圖分析，圖中的單菌落的獲得的接種方法是進(jìn)行稀釋涂布平板法．所用的接種工具是涂布器，該同學(xué)可能的操作失誤是涂布不均勻倒置菌落分布不均勻．
（4）根據(jù)題意可知，該菌液中的細(xì)菌X數(shù)量約為（61+62+63）÷3÷0.2×1000=3.1×10⁵個(gè)/ml．
故答案為：
（1）C  A培養(yǎng)基中缺乏氮源  B培養(yǎng)基中含有機(jī)廢水以外的碳源（后兩空可交換順序）
（2）高壓蒸汽  不加入廢水（或未接種或加入等量無(wú)菌水）  瓊脂  甘油管藏
（3）稀釋涂布平板法  涂布器  涂布不均勻
（4）3.1×10⁵

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的篩選與分離及微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)微生物的篩選與培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)的理解與運(yùn)用．