Question

EcoRⅠ能專一識別GAATTC，并在G和A之間將這段序列切開；SmaⅠ則能專一識別CCCGGG，并在C和G之間切割形成平末端．如圖是含某目的基因的DNA片段，據(jù)圖回答下列問題：

（1）根據(jù)圖示可知，若用EcoR I和SmaI切割，則此DNA片段可有

 

個限制酶切割位點，切割后共有

 

種

 

個切割末端．EcoRⅠ切割后形成的末端是

 

末端．
（2）如果EcoR I切割形成的目的基因片段要導入受體細胞，一般需要質(zhì)粒作載體．作為載體應具備的特點是

 

、

 

、

 

．
（3）若要獲取需要的轉(zhuǎn)基因生物，則最基本的操作步驟為獲取目的基因、

 

、

 

和

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定
限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點；②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選③能在宿主細胞中穩(wěn)定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．

解答： 解：（1）由圖可知，圖中有三個切割位點，如圖所示EcoRⅠ切割后形成的末端黏性末端，SmaⅠ切割后形成的末端是平末端，共2種切割末端，6個切割末端．
（2）作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點；②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選③能在宿主細胞中穩(wěn)定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．
（3）基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細胞，④目的基因的檢測與鑒定
故答案為：
（1）3　　2　　6　　黏性
（2）至少有一個限制酶切割位點　　能自我復制　　含標記基因
（3）基因表達載體的構(gòu)建　　將目的基因?qū)�入受體細胞　　目的基因的檢測與鑒定

點評：本題考查基因工程內(nèi)容，要求學生識記基因工程的操作原理和步驟，理解運載體具備的條件和限制的切割過程．