Question

【題目】科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)絨山羊的羊絨質(zhì)量與毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因密切相關(guān)，獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖1所示．圖2表示KIFⅡ基因與pZHZ1質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程，A，B，C，D為四種識(shí)別切割序列完全不同的限制酶的酶切位點(diǎn)．已知質(zhì)粒pZHZ1的長(zhǎng)度為3.7kb（1kb=1000對(duì)堿基），其中A～B區(qū)域長(zhǎng)度為0.8kb，B～C區(qū)域長(zhǎng)度為0.2kb，C～D區(qū)域長(zhǎng)度為0.5kb．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）圖1中構(gòu)建的重組表達(dá)載體，目的基因的上游應(yīng)有 ， 驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄．
（2）在圖1過(guò)程③中，用激素處理以獲取更多的卵（母）細(xì)胞，這些卵（母）細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到期，方可進(jìn)行過(guò)程④的操作．
（3）圖1中過(guò)程④采用的生物技術(shù)是 ， 得到的重組細(xì)胞發(fā)育為早期胚胎后，可通過(guò)技術(shù)獲得較多胚胎．
（4）現(xiàn)分別用限制酶A，D切割圖2中重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，結(jié)果被酶A切割成1.7kb和3.4kb兩個(gè)片段，被酶D切割成1.9kb和3.2kb兩個(gè)片段．據(jù)此判斷KIFⅡ基因大小為 ， 并請(qǐng)將目的基因內(nèi)部的酶D切割位點(diǎn)用相應(yīng)的字母（D）標(biāo)注在圖3中．

Answer 1

【答案】
（1）啟動(dòng)子
（2）促性腺；減數(shù)第二次分裂中期
（3）細(xì)胞核移植；胚胎分割
（4）1.6 kb；
【解析】解：（1）圖1中構(gòu)建的重組表達(dá)載體，其組成包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因，其中目的基因的上游應(yīng)有啟動(dòng)子，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄．（2）用促性腺激素可對(duì)動(dòng)物進(jìn)行超數(shù)排卵處理．卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟．（3）圖1中④過(guò)程采用了細(xì)胞核移植技術(shù)；來(lái)自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，在胚胎移植時(shí)，可通過(guò)胚胎分割技術(shù)獲得更多的胚胎．（4）已知質(zhì)粒pZHZ1的長(zhǎng)度為3.7kb，其中BC區(qū)域長(zhǎng)度為0.2kb，所以切去BC段后的質(zhì)粒長(zhǎng)度為3.7﹣0.2=3.5kb．現(xiàn)用限制酶A、D切割重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，結(jié)果被酶A切割成1.7kb和3.4kb兩個(gè)片段，可知重組質(zhì)粒pZHZ2的總長(zhǎng)度為1.7+3.4=5.1kb，所以KIFⅡ基因長(zhǎng)度為5.1﹣3.5=1.6kb．重組質(zhì)粒中A的切割位點(diǎn)距B的切割位點(diǎn)0.8kb，單獨(dú)用限制酶A切割后產(chǎn)生1.7kb和3.4kb兩個(gè)片段，說(shuō)明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來(lái)的A酶識(shí)別位點(diǎn)外，還有一個(gè)A酶識(shí)別位點(diǎn)；D酶的酶切位點(diǎn)距C0.5kb，用D單獨(dú)酶切后產(chǎn)生1.9kb和3.2kb兩個(gè)片段，說(shuō)明在重組質(zhì)粒中含有一個(gè)D的酶切位點(diǎn)，根據(jù)題中信息提示“目的基因內(nèi)部的酶D切割位點(diǎn)用相應(yīng)的字母（D）標(biāo)注在圖3中”，可確定在BC之間含有D的一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)，D的識(shí)別位點(diǎn)在距B右側(cè)0.2kb處，距A右側(cè)1.0kb處，如下圖所示： ．
【考點(diǎn)精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)才能正確解答此題．