Question

【題目】圖1為某種普通質(zhì)粒的示意圖，質(zhì)粒上3種限制酶的酶切位點(diǎn)如圖所示（箭頭表示識(shí)別序列）。圖2表示制備抗體的兩個(gè)途徑的模式圖。

（1）據(jù)圖1提供的信息，你推薦最好采用_____酶去切割質(zhì)粒較為理想。

（2）圖2中 ③④⑤⑥過(guò)程中的目的基因是_____。 圖中獲取該目的基因的方法是_____。

（3）圖2中①過(guò)程形成的Y細(xì)胞稱(chēng)為_____細(xì)胞，過(guò)程①的原理_____。

（4）抗體2在人體內(nèi)引起免疫反應(yīng)，這個(gè)過(guò)程屬于_____。

A．細(xì)胞免疫 B．人工免疫 C．體液免疫 D．特異性免疫

（5）過(guò)程①需要采用的生物技術(shù)是_____。通過(guò)圖2中①②過(guò)程獲得的抗體1屬于_____工程。

A．基因工程 B．細(xì)胞工程 C．發(fā)酵工程 D．酶工程

（6）下列①～④表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)的步驟，其中步驟④是_____；根據(jù)基因工程過(guò)程請(qǐng)將①﹣④步驟排序以實(shí)現(xiàn)獲取抗體2，正確排序_____。

①重組DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞

②篩選含目的基因的受體細(xì)胞

③人工合成目的基因

④　 　

（7）為了檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入大腸桿菌，需要進(jìn)行篩選。其操作過(guò)程如下，請(qǐng)把下列各步填寫(xiě)完整：

第一步，配制培養(yǎng)基。除下表中的成分外，還必須添加_____。

第二步，菌液用_____法接種在第一步配制的培養(yǎng)基上。

第三步，選擇目標(biāo)菌落擴(kuò)大培養(yǎng)。

牛肉膏	0.5g
蛋白胨	1g
NaCl	0.5g
瓊脂	2g
水	200mL

Answer 1

【答案】Pst I V1 基因 化學(xué)方法人工合成（逆轉(zhuǎn)錄法） 雜交瘤細(xì)胞 利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性/一定的流動(dòng)性 C D 細(xì)胞融合技術(shù) B 目的基因與運(yùn)載體的連接 ③④①② 新霉素 稀釋涂布法

【解析】

1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。

2、據(jù)圖2分析可知，細(xì)胞A表示效應(yīng)B細(xì)胞，細(xì)胞Y表示雜交瘤細(xì)胞，①過(guò)程表示動(dòng)物細(xì)胞融合，②過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，③過(guò)程提取信使RNA，④過(guò)程表示逆轉(zhuǎn)錄，⑤表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，⑥表示導(dǎo)入受體細(xì)胞。

（1）切割質(zhì)粒時(shí)要保證目的基因和復(fù)制原點(diǎn)不被破壞，因此選擇限制酶Pst I 酶切割較為理想。

（2）由圖可知，③④⑤⑥過(guò)程中的目的基因是V1基因。 圖中獲取該目的基因的方法是化學(xué)方法人工合成（或逆轉(zhuǎn)錄法）。

（3）過(guò)程①至②抗體的獲取稱(chēng)為單克隆抗體，其中①是細(xì)胞融合過(guò)程，Y細(xì)胞稱(chēng)為雜交瘤細(xì)胞；細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。

（4）抗體是體液免疫過(guò)程中產(chǎn)生的，體液免疫屬于特異性免疫。

（5）過(guò)程①需要采用細(xì)胞融合技術(shù)。通過(guò)圖2中①②過(guò)程獲得的抗體1屬于細(xì)胞工程。

（6）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�。虎诨�因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。因此，步驟④是目的基因與運(yùn)載體的連接，正確排序③④①②。

（7）用限制酶Pst I 酶切割會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，但沒(méi)有破壞新霉素基因，因此配制培養(yǎng)基時(shí)，除下表中的成分外，還必須添加新霉素。菌液用稀釋涂布法接種在第一步配制的培養(yǎng)基上