Question

10．科技工作者常常將小鼠作為轉基因動物用于治療高血壓藥物的篩選．
（1）若與高血壓有關的基因是由mRNA反轉錄產(chǎn)生的cDNA片段，則需在其上游添加啟動子，質粒作為運栽體．
（2）為了獲得更多的卵母細胞，需用促性腺激素對雌鼠進行處理．從輸卵管中采集的卵母細胞，在體外可與經(jīng)過獲能處理的精子完成受精作用．
（3）在體外培養(yǎng)受精卵時，培養(yǎng)液中除了給予一定量的O₂以維持細胞呼吸外，還需要提供CO₂氣體以維持培養(yǎng)液的pH．胚胎移植時如需獲得胚胎干細胞，可從培養(yǎng)至囊胚期的早期胚胎的內(nèi)細胞團中分離．
（4）子代大鼠中如果檢測到相應蛋白質和出現(xiàn)高血壓，即可在分子水平和個體水平上說明高血壓相關基因已成功表達．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、動物細胞培養(yǎng)的條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）

解答 解：（1）由mRNA反轉錄產(chǎn)生的cDNA片段不含啟動子，因此以其為運載體時需在其上游添加啟動子；基因工程中，質粒作為運栽體．
（2）用促性腺激素處理母畜可促使其超數(shù)排卵；從輸卵管中采集的卵母細胞已經(jīng)成熟，在體外可與經(jīng)過獲能處理的精子完成受精作用．
（3）動物細胞培養(yǎng)時，需要提供CO₂氣體以維持培養(yǎng)液的pH．胚胎干細胞可以來自早期胚胎（囊胚的內(nèi)細胞團）．
（4）子代大鼠中如果檢測到相應蛋白質和出現(xiàn)高血壓，即可在分子水平和個體水平上說明高血壓相關基因已成功表達．
故答案為：
（1）啟動子   運載體
（2）促性腺    獲能
（3）pH  內(nèi)細胞團
（4）檢測到相應蛋白質和出現(xiàn)高血壓

點評 本題考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作步驟及相關細節(jié)；識記動物細胞培養(yǎng)的條件；識記胚胎干細胞的來源等知識，能結合所學的知識準確答題．