Question

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上，常常需要進行微生物的培養(yǎng)和計數(shù)．請分析回答．
（1）如圖是利用

 

法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步

 

分散到培養(yǎng)基的表面．
（2）分析下面培養(yǎng)基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄?7H₂O、KCl、H₂O．若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細菌，則應除去上述

 

成分，并加入

 

物質(zhì)，以補充

 

源．
（3）四位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)量．在對應稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確可信的是

 

．
A．一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是23
B．兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是22和26，取平均值24
C．三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、5和52，取平均值26
D．四個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、30、24和25，取平均值25
（4）一同學在稀釋倍數(shù)為10⁵的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL）

 

．
（5）用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量

 

，因為

 

．
（6）某同學在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了？

 

，為什么？

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),測定某種微生物的數(shù)量

專題：

分析：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法．若要對微生物進行取樣計數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法．稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)．培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．

解答： 解：（1）由圖可知，其采取的是平板劃線法，該方法能把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（2）培養(yǎng)分解尿素的細菌，其氮源是尿素，所以培養(yǎng)基中要除去含氮物質(zhì)，即去除NaNO₃，并加入尿素和葡萄糖，以提供氮源和碳源．
（3）A只涂布了一個平板，B只涂布了兩個平板，這兩位同學的實驗數(shù)據(jù)說服力不夠；C其中一個平板的計數(shù)結果與另兩個相差太遠，說明操作過程出現(xiàn)錯誤，數(shù)據(jù)缺乏真實性，因此正確可信的是D．
（4）在稀釋倍數(shù)為10⁶的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4，那么每毫升樣品（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL） 中的菌落數(shù)是=10⁵×23.4×

1

0.2

=1.17×10⁸個．
（5）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落，因此用這種方法測定得密度偏低．
（6）培養(yǎng)基上有其他雜菌的菌落，不能肯定是該大腸桿菌的品系被污染，因為不能排除雜菌來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程．
故答案為：
（1）平板劃線    稀釋
（2）NaNO₃    尿素和葡萄糖    氮、碳
（3）D
（4）1.17×10⁸
（5）多    　當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落       
（6）不能    因為不能排除雜菌來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程

點評：本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、測定某種微生物的數(shù)量等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分和微生物的接種方法，并能準確判斷圖中的接種方法；能采用稀釋涂布平板法對微生物進行計數(shù)，并能對實驗結果進行分析和簡單的計算．