Question

動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在培養(yǎng)液中加入動物血清．為了研究不同“層次”血清對細(xì)胞增殖的影響，科研人員做了以下實(shí)驗(yàn)：
將分離出的牛血清裝入專用血清瓶后放入冰箱中直立靜置一段時(shí)間．取三根刻度吸管，將血清從上到下輕輕吸成均等的三份，分別裝入消毒后的瓶中，標(biāo)記為上、中、下，再分別從三個(gè)瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中，混合均勻備用．分別取等量的不同“層次“的血清和混合血清加入到新配制的動物細(xì)胞培養(yǎng)液中，再接種小鼠上皮細(xì)胞（接種細(xì)胞密度為5×10⁴個(gè)/mL），在適宜條件下培養(yǎng)72h后，進(jìn)行計(jì)數(shù)．結(jié)果如表：

組別	上	中	下	混
72h 細(xì)胞數(shù)/個(gè)?mL-1	9.75×104	1.04×105	7.5×104	1.85×105

請回答：
（1）吸取血清過程中，要嚴(yán)格禁止震動和搖晃，目的是

 

．
（2）細(xì)胞培養(yǎng)過程中，二氧化碳的主要作用是

 

，每天更換培養(yǎng)基的目的是

 

．
（3）如果用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)進(jìn)行如圖所示的操作，統(tǒng)計(jì)出來的數(shù)據(jù)比實(shí)際值偏

 

，正確的操作應(yīng)該是

 

．

（4）從表中結(jié)果可以看出，不同“層次”的血清對細(xì)胞增殖的影響不同．造成這種結(jié)果的主要原因是不同“層次“血清中

 

．
（5）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，正確使用血清的方法是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：分析表格：表中為上、中、下三層血清及混合血清中細(xì)胞增殖情況，不同“層次”的血清對細(xì)胞增殖的影響不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，因此在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，正確使用血清的方法是將血清充分混勻后再加人到培養(yǎng)液中．

解答： 解：（1）本實(shí)驗(yàn)的目的是研究不同“層次”血清對細(xì)胞增殖的影響，因此吸取血清過程中，要嚴(yán)格禁止震動和搖晃，防止不同層次血清混合．
（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，即95%氧氣+5%二氧化碳，其中二氧化碳的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；每天更換培養(yǎng)基可以補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)，并能去除代謝廢物，這樣有利于細(xì)胞增殖．
（3）如果用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)，應(yīng)該先蓋上蓋玻片，后滴加細(xì)胞懸液，若先滴加細(xì)胞懸液，后蓋上蓋玻片，則統(tǒng)計(jì)出來的數(shù)據(jù)比實(shí)際值偏大．
（4）由表可知，不同“層次”的血清對細(xì)胞增殖的影響不同，且均比混合血清中自爆增殖速度慢，原因主要是不同“層次“血清中營養(yǎng)成分不全．
（5）由表可知混合血清中細(xì)胞增殖速率最快，因此在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，正確使用血清的方法是將血清充分混勻后再加人到培養(yǎng)液中．
故答案為：
（1）防止不同層次血清混合
（2）維持培養(yǎng)液的pH     補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)和去除代謝廢物，有利于細(xì)胞增殖
（3）大    先蓋上蓋玻片，后滴細(xì)胞懸液
（4）營養(yǎng)成分不全（或營養(yǎng)成分不同） 
（5）將血清充分混勻后再加人到培養(yǎng)液中

點(diǎn)評：本題結(jié)合圖表，考查動物細(xì)胞培養(yǎng)及探究實(shí)驗(yàn)，要求考生識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用；明確實(shí)驗(yàn)的目的，掌握探究實(shí)驗(yàn)的原則，能分析表中數(shù)據(jù)進(jìn)行信息轉(zhuǎn)化，并得出正確的結(jié)論，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查．