Question

13．運用現(xiàn)代生物技術(shù)的育種方法，將抗菜青蟲的Bt基因轉(zhuǎn)移到優(yōu)質(zhì)油菜中，培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲的油菜品種．這一品種在生長過程中能產(chǎn)生特異的殺蟲蛋白，對菜青蟲有顯著抗性，能大大減輕菜青蟲對油菜的危害，提高油菜產(chǎn)量，減少農(nóng)藥使用，保護農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境．

（1）將Bt毒蛋白基因從蘇云金芽孢桿菌DNA中剪切出來的“分子手術(shù)刀”是限制酶，它能使雙鏈DNA每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵鍵斷開：該基因表達(dá)載體中除了Bt毒蛋白基因外，還必須有啟動子、終止子以及標(biāo)記基因等．
（2）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法有很多種，題中所用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜的培育是否成功，最簡便的檢測方法是用該油菜葉飼喂害蟲．
（4）已知轉(zhuǎn)基因油菜中殺蟲蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡．而該殺蟲蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞表面無（相應(yīng)的）特異性受體．
（5）轉(zhuǎn)基因油菜獲得的抗蟲性狀是由Bt毒蛋白基因的表達(dá) 產(chǎn)物來體現(xiàn)的，蘇云金芽孢桿菌中的Bt毒蛋白基因和油菜細(xì)胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白在功能和氨基酸序列上是相同的．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）將目的基因（Bt毒蛋白基因）從外源DNA中剪切出來的“分子手術(shù)刀”是限制酶，它能使雙鏈DNA每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；基因表達(dá)載體的組成包括目的基因（Bt毒蛋白基因）、啟動子、終止子以及標(biāo)記基因等．
（2）由圖可知，題中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（3）轉(zhuǎn)基因抗蟲油菜的培育是否成功，最簡便的檢測方法是用該油菜葉飼喂害蟲，若害蟲死亡則說明培育成功．
（4）已知轉(zhuǎn)基因油菜中殺蟲蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲死亡．而該殺蟲蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細(xì)胞表面無（相應(yīng)的）特異性受體．
（5）轉(zhuǎn)基因油菜獲得的抗蟲性狀是由Bt毒蛋白基因的表達(dá)產(chǎn)物來體現(xiàn)的，蘇云金芽孢桿菌中的Bt毒蛋白基因和油菜細(xì)胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白在功能和
氨基酸序列上是相同的．
故答案為：
（1）限制酶     磷酸二酯鍵     標(biāo)記基因
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（3）用該油菜葉飼喂害蟲
（4）無（相應(yīng)的）特異性受體
（5）抗蟲性狀    氨基酸

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．