Question

【題目】國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升酸奶產(chǎn)品中乳酸菌數(shù)量不得低于1×106個。為了解某酸奶中的乳酸菌含量是否達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)，某興趣小組進行了如下實驗，請回答下列問題：

（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基的碳源為________________(填“含碳無機物”或“含碳有機物”)。檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格的方法是________________________________________________________。

（2）樣品稀釋：先將樣品稀釋10倍，可用無菌移液管吸取5 mL酸奶樣品加入盛有_________mL無菌水的三角瓶中，使樣品與水充分混勻。然后進行系列梯度稀釋操作，得到稀釋105、106、107倍的樣品。

（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計：吸取不同稀釋度的樣品各0.1 mL，分別置于不同培養(yǎng)皿內(nèi)，加入適宜溫度的溶化狀態(tài)的培養(yǎng)基，使之混合均勻，冷卻成平板。每個稀釋度做3個重復(fù)。在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，對平板的菌落數(shù)進行統(tǒng)計,結(jié)果如下：

稀釋度(倍)	105			106			107
平板	1	2	3	1	2	3	1	2	3
平板菌落數(shù)(個)	433	422	444	78	74	82	10	6	8

為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)選擇上述稀釋度為_____________倍的平板菌落數(shù)作為統(tǒng)計結(jié)果，計算出每毫升樣品中乳酸菌數(shù)量為_______________個。

（4）在培養(yǎng)時,需要將培養(yǎng)皿倒置,原因是____________。

Answer 1

【答案】含碳有機物 將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱培養(yǎng)一段時間,觀察是否有菌落生長 45 106 7.8×108 ①防止冷凝水滴落到培養(yǎng)基上造成雜菌污染；②減少培養(yǎng)基水分的散失

【解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。
2、稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

3、菌落計數(shù)時，為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般要選擇平菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù)。

（1）根據(jù)題意可知，該實驗?zāi)康臑榱私饽乘崮讨械娜樗峋�含量是否達(dá)標(biāo)，而乳酸菌屬于異養(yǎng)型生物，因此培養(yǎng)基的碳源為含碳有機物。檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格，可取若干滅菌后未接種的培養(yǎng)基（或空白平板）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生長。
（2）將樣品稀釋10倍，即酸奶樣品體積：無菌水體積=1：9，即可用無菌移液管吸取5mL酸奶樣品加入盛有5×9=45mL無菌水的三角瓶中，使樣品與水充分混勻。
（3）稀釋涂布平板法進行計數(shù)時，應(yīng)選擇平板上30～300的菌落數(shù)進行計數(shù)，因此應(yīng)選擇上述稀釋度為106倍的平板菌落數(shù)作為統(tǒng)計結(jié)果，計算出樣品中每毫升乳酸菌數(shù)=（78+74+82）÷3÷0.1×107=7.8×108個。
（4）在培養(yǎng)時，需要將培養(yǎng)皿倒置，原因是①防止冷凝水滴落到培養(yǎng)基上造成雜菌污染；②減少培養(yǎng)基水分的散失。