Question

實(shí)驗(yàn)表明，乙植物的耐旱能力很差．某研究機(jī)構(gòu)計(jì)劃采用基因工程的方法，通過下圖所示的程序培育耐旱的乙植物新品種：

請據(jù)圖回答下列相關(guān)問題：
①通過PCR技術(shù)擴(kuò)增耐旱基因時(shí)，需要Taq酶，該酶最大的特點(diǎn)是

 

．
②圖中使用的載體最可能是

 

．在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，耐旱基因應(yīng)該插入到該載體的

 

中．
③圖中的載體上必須含有標(biāo)記基因，以便檢測

 

細(xì)胞和

 

細(xì)胞中是否導(dǎo)入了

 

．
④B過程中，常用

 

處理使細(xì)菌轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞，從而利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入．D過程采用的方法是

 

．若把重組質(zhì)粒導(dǎo)人動(dòng)物細(xì)胞，常采用的方法是

 

．
⑤如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進(jìn)行檢測，應(yīng)該用

 

作為探針．
⑥若要利用蛋白質(zhì)工程繼續(xù)提高油料植物的出油率，其設(shè)計(jì)流程應(yīng)從預(yù)期的

 

出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的

 

結(jié)構(gòu)，推測出應(yīng)有的

 

序列，然后找到相對應(yīng)的

 

序列，再用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改變現(xiàn)有性狀．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：分析題圖：圖示為培育耐旱的乙植物新品種的過程，其中A表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；B表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞；C表示用選擇培養(yǎng)基篩選出含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌；D表示用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌干擾乙植物體細(xì)胞，進(jìn)而將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株．

解答： 解：①PCR技術(shù)需要在較高溫度條件下進(jìn)行，因此需要耐高溫DNA聚合酶，即Taq酶．
②圖中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，因此使用的載體最可能是Ti質(zhì)粒；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，耐旱基因應(yīng)該插入到該載體的T-DNA中．
③載體上必須含有標(biāo)記基因，以便檢測農(nóng)桿菌細(xì)胞和乙植物的愈傷組織細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因．
④B表示將表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌的過程，該過程中常用CaCl₂（或Ca²⁺） 處理細(xì)菌使之轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞，從而利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入．由圖可知，D過程采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．將重組質(zhì)粒導(dǎo)人動(dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
⑤探針是指用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段．因此，本實(shí)驗(yàn)中的探針是指放射性同位素標(biāo)記的耐旱基因．
⑥蛋白質(zhì)工程的設(shè)計(jì)流程：應(yīng)從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測出應(yīng)有的氨基酸序列，然后找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，再用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改變現(xiàn)有性狀．
故答案為：
①耐高溫
②Ti質(zhì)粒    T-DNA
③農(nóng)桿菌    乙植物的愈傷組織     目的基因
④CaCl₂（或Ca²⁺）     農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    顯微注射法
⑤放射性同位素標(biāo)記的耐旱基因
⑥蛋白質(zhì)功能     蛋白質(zhì)    氨基酸    脫氧核苷酸

點(diǎn)評：本題結(jié)合培育耐旱的乙植物新品種的過程圖解，考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中應(yīng)注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記蛋白質(zhì)工程的概念及操作過程，能結(jié)合圖中信息答題．