Question

2．人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷．如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答問題．

（1）制備單克隆抗體過程中要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
（2）制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于抗原，注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了效應(yīng)B細(xì)胞和記憶細(xì)胞 等細(xì)胞以及抗體物質(zhì)，此過程屬于特異性免疫中的體液免疫．
（3）細(xì)胞內(nèi)DNA的合成一般有兩條途徑，主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻斷此途徑．輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶的催化作用合成DNA，而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒有此輔助途徑．
①利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的氨基嘌呤成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
②最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是能無限增殖并分泌特異性抗體．（2分）
（4）此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與人絨毛膜促性腺激素（或HCG）特異性結(jié)合，從而診斷早孕．
（5）B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合時(shí)，常用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是滅活的病毒，
在動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是一層．而在體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是多層．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體．具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)．
2、單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞．利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞．第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞．
3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)．②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”．
4、從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞為原代細(xì)胞．原代培養(yǎng)細(xì)胞傳至10代左右就不容易傳下去，細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞能存活傳到40～50代，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞株．細(xì)胞株傳到50左右不能再繼續(xù)傳代，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，這部分細(xì)胞稱為細(xì)胞系．

解答 解：（1）制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過程有：正常小鼠免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞的融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專一抗體檢驗(yàn)陽性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
（2）如圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，給小鼠注射的HCG相當(dāng)于注射抗原，使小鼠產(chǎn)生分泌抗HCG抗體相應(yīng)的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞．抗體是參與體液免疫的免疫活性物質(zhì)．
（3）①氨基嘌呤可以阻斷在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA．因此配制的HAT培養(yǎng)基中添加氨基嘌呤的成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
②雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（4）抗體與抗原發(fā)生特異性結(jié)合．人絨毛膜促性腺激素（或HCG）是抗原，可以與抗HCG單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合．
（5）B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合時(shí)，采用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合．細(xì)胞的接觸抑制：細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖．由于接觸抑制，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，瓶壁上只能形成的單層細(xì)胞．而在體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)，具有無限增值的特點(diǎn)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是多層．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　動(dòng)物細(xì)胞融合　
（2）抗原　效應(yīng)B細(xì)胞   記憶細(xì)胞   抗體　體液
（3）①氨基嘌呤　②能無限增殖并分泌特異性抗體
（4）人絨毛膜促性腺激素（或HCG）
（5）滅活的病毒  相互接觸  接觸抑制  一層  多層

點(diǎn)評(píng) 本題考查了制備單克隆抗體的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問題的能力，難度適中．