Question

2．為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品（β-胡蘿卜素較耐酸），某小組開(kāi)展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是干熱滅菌和濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該用牛皮紙包扎器皿．
（2）為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，此培養(yǎng)基從功能上分類(lèi)屬于培養(yǎng)基，添加青霉素目的是抑制細(xì)菌（放線(xiàn)菌）生長(zhǎng)．
（3）圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是．①（填序號(hào)）
①安全閥、放氣閥、壓力表②放氣閥、安全閥、壓力表
③安全閥、放氣閥、溫度表④放氣閥、安全閥、溫度表
（4）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線(xiàn)，結(jié)果其中一塊平板的各劃線(xiàn)區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng)，最可能的原因是接種環(huán)溫度過(guò)高，菌被殺死．
（5）為增加β-胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細(xì)胞時(shí)，添加石英砂的目的是有助于研磨充分；研磨時(shí)不需要（填“需要”或“不需要”）添加CaCO₃，理由是β-胡蘿卜素較耐酸
（6）下列材料或用具：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，②玻棒、試管、錐形瓶和吸管，③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手．其中需要滅菌的是：①②（填序號(hào)）；需要消毒的是：③（填序號(hào)）．
（7）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 1、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線(xiàn)消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對(duì)象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

解答 解：（1）滅菌常用方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌等，培養(yǎng)皿常用高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌．將培養(yǎng)皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報(bào)紙包扎避免滅菌后的再次污染．
（2）青霉素能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌的繁殖期起殺菌作用，因此添加青霉素可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)．
（3）乙連接軟管為排（放）氣閥，甲為安全閥，丙是壓力表．
（4）三塊平板有兩塊平板長(zhǎng)有菌落，說(shuō)明含有菌株并可在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；而其中一塊未見(jiàn)菌落，說(shuō)明菌株死亡．因此，應(yīng)在接種過(guò)程中接種環(huán)灼燒后未冷卻或未足夠冷卻，使菌株因溫度過(guò)高被殺死．
（5）石英砂有助于研磨充分．CaCO₃用于中和酸性物質(zhì)，β-胡蘿卜素較耐酸，因此不需添加．
（6）在實(shí)驗(yàn)中，①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要滅菌，③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手需要消毒．
（7）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉．
故答案為：
（1）干熱滅菌和濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）       用牛皮紙包扎器皿
（2）抑制細(xì)菌（放線(xiàn)菌）生長(zhǎng)  
（3）①
（4）接種環(huán)溫度過(guò)高，菌被殺死
（5）有助于研磨充分      不需要       β-胡蘿卜素較耐酸
（6）①②；③
（7）滅菌

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記無(wú)菌技術(shù)；試劑接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．