Question

科學(xué)家從某些能無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)許多動(dòng)物的細(xì)胞進(jìn)行分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請(qǐng)回答以下問(wèn)題．
（1）利用雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體，促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘融劑是

 

，誘融后需進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選的目的是

 

，第二次篩選的目的是

 

．
（2）有人提出，將無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG）直接導(dǎo)入B細(xì)胞亦能獲得單克隆抗體，其思路如圖甲所示．
①制備重組質(zhì)粒．
②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞“Ⅱ”，Ⅱ所指的細(xì)胞是

 

，然后進(jìn)行“檢測(cè)”，其目的是

 

．Ⅲ所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是

 

．
（3）也有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)制備單克隆抗體，其思路如圖乙所示．
①構(gòu)建重組細(xì)胞時(shí)，只選用了細(xì)胞甲的細(xì)胞質(zhì)是因?yàn)?div id="znd37bp" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

．
②選取

 

的細(xì)胞核進(jìn)行移植．
③重組細(xì)胞進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)為細(xì)胞增殖提供

 

等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)獲得的細(xì)胞群稱為

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過(guò)程,動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)

專題：

分析：據(jù)圖甲分析，用酶A（限制酶）處理供體DNA分離出無(wú)限增殖調(diào)控基因，用同種酶切割質(zhì)粒形成相同的黏性末端，用酶B（DNA連接酶）處理形成重組質(zhì)粒，導(dǎo)入Ⅱ（效應(yīng)B細(xì)胞），形成重組細(xì)胞Ⅲ．圖乙表示核移植技術(shù)，去掉無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞核，移植B淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核，形成雜種細(xì)胞．

解答： 解：（1）利用雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體，誘融劑是PEG促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合，誘融后需進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選出既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（2）分析圖甲，將無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG）直接導(dǎo)入B細(xì)胞，能獲得單克隆抗體．
①制備的重組質(zhì)粒中含有的目的基因無(wú)限增殖調(diào)控基因．
②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞Ⅱ，即效應(yīng)B細(xì)胞，接著采用抗原-抗體雜交的方法檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中能否表達(dá)．重組細(xì)胞Ⅲ是能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體的效應(yīng)B細(xì)胞．
（3）分析圖乙，用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)制備單克隆抗體．
①構(gòu)建重組細(xì)胞時(shí)，用無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，因?yàn)榧?xì)胞質(zhì)中有無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG）．
②選取效應(yīng)B細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)行移植．
③重組細(xì)胞進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)，提供水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源、動(dòng)物血清等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，雜種細(xì)胞能無(wú)限繁殖，獲得的細(xì)胞群稱為細(xì)胞系．
故答案為：
（1）PEG（聚乙二醇、滅活的病毒）  篩選出雜交瘤細(xì)胞    篩選出既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
（2）效應(yīng)B細(xì)胞  檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中能否表達(dá)（檢測(cè)受體細(xì)胞是否顯示出目的基因所控制的性狀）    即能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的效應(yīng)B細(xì)胞
（3）①細(xì)胞甲的細(xì)胞質(zhì)中有無(wú)限增殖調(diào)控基因（prG）    
②效應(yīng)B細(xì)胞 水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源、動(dòng)物血清    
③細(xì)胞系

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程、核移植技術(shù)、單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力．