Question

(2006山東濟(jì)南統(tǒng)考) 紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O₂或CO₂，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白，請(qǐng)完成下列有關(guān)問題：

(1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：______、______、______和______。

(2)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。

①加入檸檬酸鈉的目的是________________________。

②以上所述的過程即是樣品處理，它包括、______、______收集血紅蛋白溶液。

(3)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離。

①透析的目的是______________________________。

②透析的原理是______________________________。

(4)然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。

①樣品純化的目的是__________________。

②血紅蛋白有什么特點(diǎn)？　　　　　　　　　　。這一特點(diǎn)對(duì)進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離有什么意義？　　　　　　　　　　　　　　　。

 

Answer 1

（1）樣品處理　粗分離　純化　純度鑒定�。�2）①防止血液凝固�、诩t細(xì)胞的洗滌　血紅蛋白的釋放　（3）①去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)�、谕肝龃�能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi)�。�4）①通過凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去　②血紅蛋白呈現(xiàn)紅色，在凝膠色譜分離時(shí)可以通過觀察顏色來判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液　這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實(shí)驗(yàn)操

 

這是一道綜合題，考查的知識(shí)點(diǎn)包括：血紅蛋白提取和分離的程序、加入檸檬酸鈉的目的、樣品的處理、凝膠色譜法純化的目的、血紅蛋白的特點(diǎn)等知識(shí)。