Question

1．科學家通過基因工程，將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入到普通棉株細胞內(nèi)，并成功的實現(xiàn)了表達，從而培育出了能抗棉鈴蟲的棉花植株──抗蟲棉．其過程大致如圖所示：

（1）獲取Bt毒蛋白基因的方法一般有從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術(shù)擴增目的基因、人工合成法等．
（2）Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中是利用了T-DNA的可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體DNA分子上特點．Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉株細胞內(nèi)并成功實現(xiàn)表達的過程，在基因工程中稱為轉(zhuǎn)化．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞的方法很多，在該題中涉及到的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．
（4）一個基因表達載體的組成必須有啟動子、終止子、目的基因、標記基因等．
（5）目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入了受體細胞的染色體DNA分子上．這需要通檢測才能知道，檢測采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 分析圖解可知，圖中將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因和Ti質(zhì)粒進行重組，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物細胞；在利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成完整植株．
基因表達載體的構(gòu)建是基因工程中的核心步驟，其組成包括：目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點．
目的基因的檢測與鑒定
（1）分子水平上的檢測
①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)
（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
（例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來鑒定棉花是否具有抗蟲特性．）

解答 解：（1）目的基因的獲取方法一般有從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術(shù)擴增目的基因、人工合成法．
（2）Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中是利用了T-DNA的可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體DNA分子上特點．Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉株細胞內(nèi)并成功實現(xiàn)了表達的過程，在基因工程中稱為轉(zhuǎn)化．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞的方法很多，圖中利用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入棉花細胞中�?br />（4）一個基因表達載體的組成必須有啟動子、終止子、目的基因、標記基因．
（5）目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入了受體細胞的染色體DNA分子上．這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術(shù)擴增目的基因、人工合成法
（2）可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體DNA分子上   轉(zhuǎn)化
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
（4）啟動子、終止子、目的基因、標記基因
（5）目的基因是否插入了受體細胞的染色體DNA分子上 DNA分子雜交技術(shù)

點評 本題考查了基因工程的相關(guān)知識，難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的考查．要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；識記目的基因獲取的三種方法；識記基因表達載體的組成等方面的知識；要求考生能夠構(gòu)建一定的知識網(wǎng)絡．