Question

【題目】【生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題】

噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)是指將人的全部抗體基因插入噬菌體的基因組中,然后讓該噬菌體感染大腸桿菌，最終使抗體以融合蛋白的形式表達(dá)于噬菌體的表面，形成含有全套抗體譜的噬菌體抗體庫(kù)。請(qǐng)問(wèn)答下列問(wèn)題：

（1）人體內(nèi)的抗體是在________(細(xì)胞名稱)中合成后，以胞吐的方式分泌到內(nèi)環(huán)境中的。

（2）若要獲取人的抗體基因，可以從細(xì)胞中提取相應(yīng)的RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲 取______片段，再合成目的基因。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中,需要的物質(zhì)除模板鏈、四種脫氧核苷酸外,還需要____________。

（3）構(gòu)建重組DNA分子的目的是______________。在噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程中，是否需要利用CaCl2處理大腸桿菌以制備感受態(tài)細(xì)胞？請(qǐng)寫出原因:_______。

（4）檢測(cè)大腸桿菌轉(zhuǎn)錄出的相應(yīng)RNA時(shí)應(yīng)采用_______技術(shù)，即從原核細(xì)胞中提取RNA,以________為探針,與RNA雜交。該技術(shù)的原理是___________。

Answer 1

【答案】 漿細(xì)胞 cDNA 引物和DNA聚合酶(Taq酶) 使人的抗體基因在大腸桿菌細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)，并能傳遞給下一代 不需要，噬菌體可以侵染大腸桿菌，將重組DNA分子注入大腸桿菌 分子雜交 用放射性同位素標(biāo)記的目的基因（放射性同位素標(biāo)記的抗體基因） 堿基互補(bǔ)配對(duì)

【解析】試題分析：本題綜合考查學(xué)生對(duì)基因工程的知識(shí)的識(shí)記和理解能力。解答本題需熟記并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問(wèn)題情境，從題意中提取有效信息并與噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)原理、分泌蛋白的概念與分泌過(guò)程建立聯(lián)系，進(jìn)行相關(guān)問(wèn)題的解答。

(1)人體內(nèi)的抗體是在漿細(xì)胞中合成后，以胞吐的方式分泌到內(nèi)環(huán)境中。

(2)從人的細(xì)胞中提取抗體基因的RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲取cDNA片段，再合成目的基因。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中,需要的物質(zhì)除模板鏈、四種脫氧核苷酸外,還需要引物和DNA聚合酶(Taq酶)。

(3)構(gòu)建重組DNA分子（基因表達(dá)載體）的目的是：使人的抗體基因在大腸桿菌細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)，并能傳遞給下一代。由于噬菌體可以侵染大腸桿菌，將重組DNA分子注入到大腸桿菌，因此在噬菌體抗體庫(kù)的構(gòu)建過(guò)程中，不需要利用CaCl2處理大腸桿菌以制備感受態(tài)細(xì)胞。

(4) 檢測(cè)大腸桿菌轉(zhuǎn)錄出的相應(yīng)RNA時(shí)應(yīng)采用分子雜交技術(shù)，即從原核細(xì)胞中提取RNA,以用放射性同位素標(biāo)記的目的基因（放射性同位素標(biāo)記的抗體基因）為探針,與RNA雜交。該技術(shù)的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)。