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【題目】如圖是微生物平板劃線示意圖．劃線的順序為1、2、3、4、5．下列操作方法正確的是（　�。�
A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌
B.劃線操作須在火焰上進行
C.在5區(qū)域中才有可能得到所需菌落
D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌

【答案】D
【解析】解：A、進行平板劃線操作之前，用將接種環(huán)在酒精燈火焰上進行灼燒滅菌；A錯誤．B、平板劃線操作應在火焰旁進行，不能在火焰上進行；B錯誤．
C、由題圖可知，5區(qū)域是最后一個區(qū)域，有可能在5區(qū)域獲得所需要的菌落，在4區(qū)域也有可能得到所需要的菌落；C錯誤．
D、在1、2、3、4區(qū)域中劃線前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端，5區(qū)域劃線前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌目的是防止雜菌污染，1區(qū)域劃線后進行灼燒滅菌是防止污染環(huán)境及操作者；D正確．
故應選D．
閱讀題干和題圖可知，本題是與平板劃線操作有關的題目，先梳理平板劃線操作的相關知識，然后結合選項描述分析判斷．

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（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是。通過該操作形成了圖中的c，它的構成至少包括目的基因、標記基因、復制原點和等。
（2）在研究過程中獲取了目的基因后采用技術進行擴增，在構建c的過程中目的基因用(限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ)進行了切割；檢驗重組載體導入能否成功需要利用作為標記基因。
（3）過程d通常采用方法，過程e運用了植物組織培養(yǎng)技術獲得符合要求的個體。在該技術應用的過程中，關鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導植物細胞進行和。
（4）若希望該轉基因水稻生產的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好，則需要通過工程手段對合成維生素A的相關目的基因進行設計。