Question

5．用新鮮蘋果榨取果汁并制作果酒，其流程如下：
新鮮蘋果→清洗干凈→去掉果核→榨汁機(jī)榨汁→果汁從成品果酒中分離酵母菌→擴(kuò)大培養(yǎng)→固定化酵母細(xì)胞→發(fā)酵→果酒
（1）若榨取的果汁非常渾濁，解決方法是用果膠酶處理．
（2）根據(jù)培養(yǎng)基的功能特點(diǎn)，分離酵母菌應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基，固定化酵母細(xì)胞常采用包埋法，若想使這些酵母細(xì)胞能反復(fù)使用，需注意無(wú)菌條件（避免微生物的污染）．
（3）若想檢測(cè)果酒中酵母菌的密度，可采用稀釋涂布平板或顯微計(jì)數(shù)法法．
（4）欲長(zhǎng)久保留酵母菌，可將菌液甘油冷藏保存．
（5）若果酒放置一段時(shí)間后，有明顯酸味，最可能的原因是醋酸菌有氧呼吸，果酒轉(zhuǎn)變成果醋．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法
（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
 ①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)； ③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌．
（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）
 ①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌．
②操作
a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性．
b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)．
3、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
4、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．果醋制作的原理：
當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿幔?/p>

解答 解：（1）若榨取的果汁非常渾濁，可用果膠酶處理．
（2）培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基，分離酵母菌應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基；固定化酵母細(xì)胞常采用包埋法，若想使這些酵母細(xì)胞能反復(fù)使用，需注意無(wú)菌條件（避免微生物的污染）．
（3）若想檢測(cè)果酒中酵母菌的密度，可采用稀釋涂布平板或顯微計(jì)數(shù)法．
（4）欲長(zhǎng)久保留酵母菌，可將菌液 甘油冷藏保存．
（5）若果酒放置一段時(shí)間后，有明顯酸味，最可能的原因是 醋酸菌有氧呼吸，果酒轉(zhuǎn)變成果醋．
故答案為：
（1）用果膠酶處理
（2）選擇　　包埋　　無(wú)菌條件（避免微生物的污染）
（3）稀釋涂布平板  或 顯微計(jì)數(shù)法
（4）甘油冷藏
（5）醋酸菌有氧呼吸，果酒轉(zhuǎn)變成果醋

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、果酒和果醋的制作，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分及種類；識(shí)記計(jì)數(shù)微生物的方法；識(shí)記果酒和果醋制作的原理，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．