Question

在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)．如圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程．請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）農(nóng)桿菌的遺傳信息分布在

 

．
（2）A過程需要的酶有

 

，重組質(zhì)粒除圖中所示條件外，還必須含有

 

．
（3）重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞通常要用

 

處理，使其成為

 

細(xì)胞，從而完成轉(zhuǎn)化．
（4）C過程為：

 

，該過程摹耷恒溫箱中進(jìn)行避光培養(yǎng)．
（5）D過程檢測(cè)抗蟲基因是否插入棉花的基因組DNA分子中，采用的是

 

技術(shù)；將轉(zhuǎn)基因抗蟲植株種植在試驗(yàn)田中，可通過

 

．檢測(cè)抗蟲基因是否表達(dá)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程示意圖，其中A表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；B表示用選擇培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌的過程；C表示脫分化過程；D表示轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的檢測(cè)．

解答： 解：（1）農(nóng)桿菌是原核生物，其遺傳信息主要分布在擬核中，此外在細(xì)胞質(zhì)的質(zhì)粒上也有少量遺傳信息．
（2）圖中A為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，還需DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因．
（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入微生物細(xì)胞時(shí)，常采用感受態(tài)細(xì)胞法，即首先用Ca²⁺處理微生物細(xì)胞，使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞，然后將將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程．
（4）將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)包括脫分化和再分化兩個(gè)過程．因此圖中C表示脫分化過程．
（5）檢測(cè)目的基因是否插入棉花的基因組DNA分子中，常采用DNA分子雜交技術(shù)；將轉(zhuǎn)基因抗蟲植株種植在試驗(yàn)田中，可通過害蟲接種（或害蟲感染）來(lái)檢測(cè)抗蟲基因是否表達(dá)．
故答案為：
（1）擬核DNA和質(zhì)粒上
（2）限制酶、DNA連接酶    啟動(dòng)子、終止子   
（3）Ca²⁺感受態(tài)   
（4）脫分化
（5）DNA分子雜交      害蟲接種（或害蟲感染）

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息答題．