Question

有機(jī)磷化合物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中作為殺蟲劑被廣泛使用，長期以來因使用其量大、范圍廣，容易造成水體污染等諸多環(huán)境問題．
（1）為了篩選甲胺磷的降解細(xì)菌，將農(nóng)藥廠的甲胺磷污染土壤懸液涂布在

 

固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，可以對降解菌進(jìn)行定向的

 

．
（2）在分離得到的菌株A中檢測到了ophc2蛋白，可以催化甲胺磷的降解，這種蛋白質(zhì)是在細(xì)胞的

 

上合成的．若要定量分析ophc2蛋白的催化能力，應(yīng)測定單位時(shí)間內(nèi)

 

．
（3）為了測定菌株A降解效率，配置0mg/L、10mg/L、30mg/L、50mg/L、70mg/L的甲胺磷溶液，測定不同濃度甲胺磷溶液的吸光值，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到吸光值與甲胺磷濃度的關(guān)系：y=0.02x-0.01，如圖所示．
將含有100mg/L甲胺磷的菌株A培養(yǎng)液分別在不同溫度下培養(yǎng)5天后，測定吸光值，結(jié)果如下表所示，已知降解率=（初始甲胺磷濃度-降解后甲胺磷濃度）/初始甲胺磷濃度，則取得的最大降解率等于

 

（忽略細(xì)菌對吸光值的影響和培養(yǎng)液體積變化），若甲胺磷自身化學(xué)分解，則計(jì)算的降解率數(shù)值會

 

（偏大、不變、偏小）．

溫度	15℃	20℃	25℃	30℃	35℃	40℃
吸光值（菌株A）	1.71	1.53	1.15	0.49	1.32	1.89

（4）繼續(xù)分析細(xì)菌的16S rDNA可以鑒定種類，提取得到菌株A的DNA后，通過

 

擴(kuò)增得到大量的16S rDNA，進(jìn)而對細(xì)菌分類．
（5）導(dǎo)入ophc2基因的煙草可獲得降解有機(jī)磷的能力，煙草花粉的遺傳物質(zhì)存在于細(xì)胞核和線粒體中，為了避免轉(zhuǎn)基因煙草的花粉對野生型煙草造成基因污染，可將ophc2基因?qū)�入煙草�?xì)胞的

 

中．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：閱讀題干和題圖可知，本題是甲胺磷的降解細(xì)菌的選擇培養(yǎng)與應(yīng)用相結(jié)合的綜合性題目，涉及的知識點(diǎn) 較多，可以根據(jù)每一小問題涉及的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識點(diǎn)進(jìn)行分析解答．

解答： 解；（1）由題意可知，篩選甲胺磷的降解細(xì)菌，可以用以甲胺磷為唯一碳源（氮源）的培養(yǎng)基，這樣只有能分解甲胺磷的微生物生長，其他微生物因缺乏碳源（氮源）而不能生長．
（2）蛋白質(zhì)合成的場所是核糖體；測定酶活性的方法是單位時(shí)間內(nèi)反應(yīng)物的減少量或生成物的增加量，由于題目中不知道甲胺磷降解的產(chǎn)物是什么，所以只能用單位時(shí)間內(nèi)甲胺磷的減少量來表示酶的活性大�。�
（3）由不同濃度甲胺磷溶液的吸光值的標(biāo)準(zhǔn)曲線可知，吸光值越大，對于的甲胺磷溶液的濃度越大，對于表格中的數(shù)據(jù)來說，吸光值越大，甲胺磷被降解的越少，所以細(xì)菌對甲胺磷降解率高的對應(yīng)的吸光值小，因此吸光值在0.49時(shí)降解率最大=100-25/100=75%；如果甲胺磷自身也會分解，則計(jì)算的降解率數(shù)值會偏大．
（4）擴(kuò)增菌株A的DNA可以用PCR技術(shù)．
（5）為了避免轉(zhuǎn)基因煙草的花粉對野生型煙草造成基因污染，可將ophc2基因?qū)�入煙草�?xì)胞葉綠體中．
故答案應(yīng)為：
（1）以甲胺磷為唯一碳源（氮源）       選擇                   （2）核糖體        甲胺磷的降解量
（3）75%       偏大                   （4）PCR               （5）葉綠體

點(diǎn)評：本題的知識點(diǎn)是選擇培養(yǎng)基的選擇作用，核糖體的功能，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)吸光值計(jì)算降解率，PCR技術(shù)的應(yīng)用等，主要考查學(xué)生對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析處理能力和運(yùn)用所學(xué)的知識 綜合解決問題的能力．