Question

7．為了調(diào)查某城市自來水的水質(zhì)情況，某研究小組對(duì)自來水水樣中的大腸桿菌含量進(jìn)行了測(cè)定，請(qǐng)回答下列問題：
（1）檢測(cè)自來水中大腸桿菌的數(shù)量，可選用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基除了為大腸桿菌的生長(zhǎng)繁殖提供水和碳源外，還可以提供氮源和無機(jī)鹽等基本營(yíng)養(yǎng)成分．該研究小組在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，選取菌落數(shù)目未定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而遺漏菌落的數(shù)目．
（2）在接種前，該研究小組隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，結(jié)果發(fā)現(xiàn)空白對(duì)照組的平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，請(qǐng)分析說明可能的原因（寫出兩點(diǎn)）：①培養(yǎng)基滅菌不合格；②倒平板過程被污染（或培養(yǎng)皿滅菌不合格）．若空白平板上無菌落出現(xiàn)，其他三組實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為33-35個(gè)，這些平板需要在37℃溫度下，pH調(diào)至中性或微堿性的條件下培養(yǎng)1-2d．
（3）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，每次劃線之前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌目的是殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種．在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是將聚集的菌體逐步進(jìn)行稀釋，以獲得單個(gè)菌落；劃線時(shí)落在培養(yǎng)基上共畫了5個(gè)區(qū)域，則需要6次灼燒接種環(huán)．
（4）直接給牲口飲用自來水或河水，牲口易出現(xiàn)腹瀉．在飲水中加土霉素可預(yù)防牲口出現(xiàn)大面積腹瀉，但長(zhǎng)期大量使用土霉素容易引起大腸桿菌產(chǎn)生抗藥性，這一過程的實(shí)質(zhì)是大腸桿菌種群的抗藥性基因頻率發(fā)生了變化．

Answer 1

分析 微生物接種常用的兩種方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落

解答 解：（1）微生物培養(yǎng)基成分應(yīng)包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源等．
（2）為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照：隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成．
（3）接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落．每次劃線之前及接種之后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，因而劃5個(gè)區(qū)域，則需要6次灼燒接種環(huán)．
（4）長(zhǎng)期大量使用土霉素容易引起大腸桿菌產(chǎn)生抗藥性，這是人工選擇的結(jié)果，實(shí)質(zhì)是大腸桿菌種群的抗藥性基因頻率發(fā)生了變化．
故答案為：
（1）氮源和無機(jī)鹽     培養(yǎng)時(shí)間不足
（2）培養(yǎng)基滅菌不合格   倒平板過程被污染（或培養(yǎng)皿滅菌不合格）   中性或微堿性
（3）殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種將聚集的菌體逐步進(jìn)行稀釋，以獲得單個(gè)菌落    6
（4）抗藥性基因頻率

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)的理解與掌握．