Question

【題目】科學家通過基因工程方法，將蘇云金芽孢桿菌的Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉株細胞內(nèi)，并成功實現(xiàn)了表達，從而培育出了能抗棉鈴蟲的棉花植株——抗蟲棉。其過程大致如圖所示：

（1）基因工程的操作程序中的核心步驟是：______________________________，需要的工具酶有____________________ 酶和_______________酶。

（2）Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有TDNA，能把目的基因插入Ti質(zhì)粒的TDNA中是利用了TDNA__________________的特點。

（3）Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉株細胞中并成功實現(xiàn)表達的過程，在基因工程中稱為__________。

（4）將目的基因?qū)�入受體細胞的方法有很多種，該題中涉及的是_________________________。

（5）目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性的關(guān)鍵是__________________，這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是_________________________________________。

Answer 1

【答案】基因表達載體的構(gòu)建 限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） DNA連接酶 可轉(zhuǎn)移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的DNA上 轉(zhuǎn)化 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 目的基因是否插入受體細胞染色體的DNA上 DNA分子雜交

【解析】

1、分析題圖：圖示為抗蟲棉的培育過程，首先獲取目的基因；構(gòu)建基因表達載體；其次采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入棉花細胞；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。

2、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定。其中基因表達載體的構(gòu)建是核心步驟。需要的工具有限制酶、DNA連接酶、運載體。

（1）據(jù)基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟；工具酶包括限制酶和DNA連接酶。

（2）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA具有可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上的特點，因此可以用來導入目的基因。

（3）Bt毒蛋白基因轉(zhuǎn)入普通棉株細胞內(nèi)并成功實現(xiàn)了表達的過程，在基因工程中稱為轉(zhuǎn)化。

（4）本題中將目的基因?qū)�入受體細胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

（5）目的基因是否插入到受體細胞染色體DNA上是目的基因能否在棉株體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵，可通過DNA分子雜交技術(shù)進行檢測目的基因是否導入受體細胞。