Question

19．關(guān)于基因工程問題
接種疫苗是對(duì)乙肝最有效的治療方法．目前治療性乙肝疫苗主要為基因工程疫苗．為了有效治療慢性肝炎病毒，采用“雙質(zhì)�！被�因疫苗，其構(gòu)建、生產(chǎn)過程如圖2：

（1）可通過PCR（體外擴(kuò)增）技術(shù)增加目的基因、聯(lián)合基因的數(shù)量．
（2）圖2中的目的基因是指乙肝病毒結(jié)構(gòu)中的蛋白質(zhì)或包膜或衣殼或酶基因，其作用是作為抗原，刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生記憶B、T淋巴細(xì)胞．
（3）據(jù)圖1、2推知，利用IL-2、IFN-γ聯(lián)合基因構(gòu)建重組質(zhì)粒-2的目的是表達(dá)IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射給慢性乙肝患者，彌補(bǔ)患者體內(nèi)IL-2、IFN-γ分子不足，促進(jìn)T細(xì)胞分裂分化，形成更多致敏T細(xì)胞，提高細(xì)胞免疫功能．．
（4）若要構(gòu)成能有效表達(dá)的重組質(zhì)粒1，并提高重組效率，選擇的限制酶是SnaBⅠ和BglⅡ；限制酶作用后，含目的基因1的乙肝病毒DNA區(qū)段將分解成4個(gè)大小不一的片段．
（5）若用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質(zhì)粒，獲得的DNA片段的長度分別是6、4、48KB；用限制酶SnaBⅠ、BaMⅠ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質(zhì)粒，得到的DNA片段的長度分別是7.5、2.5、24、24KB；用箭頭與數(shù)字在pCDNA質(zhì)粒圖中表示限制酶BaMI的位點(diǎn)．作用位點(diǎn)2個(gè)，分別作用于距SnaBⅠ酶切位點(diǎn)右側(cè)1.5或2.5KB處，以及左側(cè)24KB處．
或
（6）最近不乏有關(guān)轉(zhuǎn)基因乙肝疫苗番茄、玉米等報(bào)道，認(rèn)為吃番茄的同時(shí)就可以輕松獲得疫苗接種，請(qǐng)從人體相關(guān)生理指出這種接種方式效果很不理想的依據(jù)：抗原主要有效成分是蛋白質(zhì)，若口服，蛋白質(zhì)易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用．
乙肝病毒的遺傳信息傳遞與表達(dá)過程如圖3：
（7）關(guān)于圖3的解釋，正確的有AD（多選）．
A．需要DNA解旋酶的過程有①②；
B．逆轉(zhuǎn)錄過程是②③④；
C．過程③發(fā)生在肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中；
D．能發(fā)生A、U配對(duì)的過程有④⑥

Answer 1

分析 分析圖1：圖1表示特異性免疫過程，其中A是吞噬細(xì)胞，B是B細(xì)胞，C是記憶細(xì)胞，D是漿細(xì)胞，E是記憶細(xì)胞，F(xiàn)是效應(yīng)T細(xì)胞，物質(zhì)甲是淋巴因子，物質(zhì)乙是抗體．
分析圖2：圖2是“雙質(zhì)�！被�因疫苗的構(gòu)建和生產(chǎn)過程．
分析圖3：①表示DNA的擴(kuò)增，②表示解旋過程，③表示轉(zhuǎn)錄過程，④⑤⑦表示逆轉(zhuǎn)錄過程，⑥表示翻譯過程．

解答 解：（1）PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因．
（2）圖2中的目的基因是指乙肝病毒結(jié)構(gòu)中的蛋白質(zhì)或包膜或衣殼或酶基因，其作用是作為抗原，刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生記憶B、T淋巴細(xì)胞．
（3）根據(jù)圖1可知IL-2、IFN-γ是免疫分子，因此利用IL-2、IFN-γ聯(lián)合基因構(gòu)建重組質(zhì)粒-2的目的是表達(dá)IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射給慢性乙肝患者，彌補(bǔ)患者體內(nèi)IL-2、IFN-γ分子不足，促進(jìn)T細(xì)胞分裂分化，形成更多致敏T細(xì)胞，提高細(xì)胞免疫功能．
（4）由圖可知，含有目的基因的外源DNA分子上含有限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ、AluⅠ的切割位點(diǎn)，若用AvrⅡ切割會(huì)破壞目的基因，若用AluⅠ切割會(huì)破壞質(zhì)粒上的啟動(dòng)子，因此要構(gòu)成能有效表達(dá)的重組質(zhì)粒1，并提高重組效率，選擇的限制酶是SnaBⅠ和BglⅡ；含有目的基因的外源DNA分子上含有2個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)，含有1個(gè)SnaBⅠ切割位點(diǎn)，因此用這兩種限制酶作用后，含目的基因1的乙肝病毒DNA區(qū)段將分解成4個(gè)大小不一的片段．
（5）若用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質(zhì)粒，獲得的DNA片段的長度分別是6、4、48KB；用限制酶SnaBⅠ、BaMⅠ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質(zhì)粒，得到的DNA片段的長度分別是7.5、2.5、24、24KB．因此，在pCDNA質(zhì)粒中有2個(gè)限制酶BaMI的位點(diǎn)，分別作用于距SnaBⅠ酶切位點(diǎn)右側(cè)1.5或2.5KB處，以及左側(cè)24KB處，如圖
或．
（6）抗原主要有效成分是蛋白質(zhì)，若口服，蛋白質(zhì)易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用，因此通過吃番茄的方式接種疫苗的效果很不理想．
（7）A、圖中①是DNA的復(fù)制過程，需要解旋酶；②是DNA雙鏈解旋的過程，也需要DNA解旋酶，A正確；
B、圖中②是解旋過程，③是轉(zhuǎn)錄過程，④是逆轉(zhuǎn)錄過程，B錯(cuò)誤；
C．過程③是轉(zhuǎn)錄，發(fā)生在肝細(xì)胞的細(xì)胞核中，C錯(cuò)誤；
D．能發(fā)生A、U配對(duì)的過程有④逆轉(zhuǎn)錄過程和⑥翻譯過程，D正確．
故選：AD．
故答案為：
（1）PCR（體外擴(kuò)增）
（2）蛋白質(zhì)或包膜或衣殼或酶  作為抗原，刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生記憶B、T淋巴細(xì)胞．
（3）表達(dá)IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射給慢性乙肝患者，彌補(bǔ)患者體內(nèi)IL-2、IFN-γ分子不足，促進(jìn)T細(xì)胞分裂分化，形成更多致敏T細(xì)胞，提高細(xì)胞免疫功能．
（4）SnaBⅠ和BglⅡ4
（5）作用位點(diǎn)2個(gè)，分別作用于距SnaBⅠ酶切位點(diǎn)右側(cè)1.5或2.5KB處，以及左側(cè)24KB處．
    或
（6）抗原主要有效成分是蛋白質(zhì)，若口服，蛋白質(zhì)易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用
（7）AD

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，綜合考查基因工程和免疫的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題．解答本題的關(guān)鍵是正確分析和理解圖解，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查．