Question

【題目】某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實(shí)驗(yàn)中，準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計(jì)的“血紅蛋白提取、分離流程圖”如下：

（1）樣品處理過程中紅細(xì)胞的洗滌要用________________反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH＝7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢�，可以破碎紅細(xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是_________________________________________。

（2）血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是去除________________雜質(zhì)。

（3）凝膠色譜法又叫______________________，是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡(jiǎn)單的分離分析技術(shù)，由于設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對(duì)_____分子物質(zhì)有很高的分離效果。

（4）電泳法是利用了待分離樣品中各種分子的帶電性質(zhì)及分子大小、形狀等的差異，而產(chǎn)生不同遷移__________，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。常用的電泳法有_______________凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。

Answer 1

【答案】生理鹽水 滲透原理（當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí)，細(xì)胞吸水脹破） 小分子 凝膠色譜技術(shù)（或又稱分子排阻色譜法、分配色譜法） 高 速率 瓊脂糖

【解析】

蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

（1）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，需要用生理鹽水反復(fù)沖洗、離心。當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí)，細(xì)胞會(huì)吸水脹破，故可以向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH＝7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢�，破碎紅細(xì)胞。

（2）透析可以去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)。

（3）凝膠色譜法又叫分配色譜法，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快。該技術(shù)對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果。

（4）電泳法是利用了待分離樣品中各種分子的帶電性質(zhì)及分子大小、形狀等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。常用的電泳法有瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。