Question

【題目】根據(jù)各類微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點和新陳代謝類型，利用選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，結(jié)合顯微鏡檢，以及菌落特征，可以把混雜在一起的大腸桿菌、硝化細菌、乳酸菌、酵母菌、金黃色葡萄球菌、圓褐固氮菌分離開來。下面是分離篩選的方法、步驟，請根據(jù)各個步驟的條件，填寫空格中的內(nèi)容。

首先配制一系列不同性質(zhì)的固體培養(yǎng)基，然后進行高溫滅菌。再將上述微生物的混合液分別接種到各種培養(yǎng)基上培養(yǎng)。

(1)用無氮培養(yǎng)基可篩選出________。

(2)用不含有機碳源的選擇培養(yǎng)基可篩選出________菌。

(3)酵母菌的篩選需要在常規(guī)培養(yǎng)基中另外加入_____________

(4)用加了較高濃度NaCl的培養(yǎng)基可選擇出__________，或者根據(jù)菌落的顏色呈現(xiàn)________色，將其挑取單獨培養(yǎng)。

(5)利用伊紅和美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌，菌落呈____色并帶有金屬光澤的是_______菌，挑取該菌落單獨培養(yǎng)。結(jié)合顯微鏡檢和進一步用伊紅和美藍培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)來確定。

(6)在無氧環(huán)境下培養(yǎng)混合菌，_________可以生長，加入一定濃度的乳酸，使培養(yǎng)基pH充分降低，可抑制____________的生長，利用菌落特征，結(jié)合顯微鏡檢，選取生長優(yōu)勢的菌落，即可分離出________。

Answer 1

【答案】圓褐固氮菌 硝化細菌 某種抗生素，如青霉素 金黃色葡萄球菌 金黃 黑 大腸桿菌 乳酸菌和酵母菌 酵母菌 乳酸菌

【解析】

1、實驗室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。如培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理為：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。同理：圓褐固氮菌為自生固氮菌，可用不含氮源的培養(yǎng)基進行篩選。硝化細菌為自養(yǎng)型，可用不含碳源的培養(yǎng)基進行篩選。乳酸菌的耐酸性較強，金黃色葡萄球菌的耐鹽性較強，可用相應的培養(yǎng)基對其篩選。

2、也可以利用鑒別培養(yǎng)基對不同菌種根據(jù)菌落特征進行區(qū)分，并進一步分離純化。如在含伊紅-美藍的培養(yǎng)基上出現(xiàn)的黑色菌落為大腸桿菌。

（1）在無氮培養(yǎng)基上只有能自生固氮的微生物才能生長，所以利用無氮培養(yǎng)基可篩選出能夠固氮的圓褐固氮菌。

（2）在不含有機碳源的培養(yǎng)基上只有自養(yǎng)微生物才能生長，如硝化細菌是化能自養(yǎng)型，所以利用不含有機碳源的選擇培養(yǎng)基可篩選出硝化細菌。

（3）由于青霉素能抑制細菌的生長，而對真菌無影響，所以酵母菌的篩選需要在常規(guī)培養(yǎng)基中另加入某種抗生素如青霉素。

（4）由于金黃色葡萄球菌能在較高濃度NaCl的培養(yǎng)基生長，所以利用含較高濃度NaCl的培養(yǎng)基可選擇出耐鹽的金黃色葡萄球菌�；蛘吒鶕�(jù)菌落的顏色呈現(xiàn)金黃色，將其挑取單獨培養(yǎng)。

（5）由于大腸桿菌在伊紅一美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)時形成的菌落成黑色并帶有金屬光澤，所以可以利用伊紅-美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌，菌落呈黑色的是大腸桿菌，挑取該菌落單獨培養(yǎng)，結(jié)合顯微鏡鏡檢和進一步用伊紅-美藍鑒別培養(yǎng)基來確定。

（6）在無氧環(huán)境下培養(yǎng)混合菌，厭氧和兼性厭氧的菌體可以生長，故上述菌體中厭氧的大腸桿菌、乳酸菌和兼性厭氧的酵母菌能夠生長，加入一定濃度的乳酸，使培養(yǎng)基pH充分降低，可抑制酵母菌的生長，利用菌落特征，結(jié)合顯微鏡鏡檢，選取生長優(yōu)勢的菌落，即可分離出乳酸菌。