Question

血栓主要由不溶性的纖維蛋白等物質(zhì)組成．納豆激酶（NK）是一種在納豆發(fā)酵過(guò)程中由納豆菌產(chǎn)生的蛋白酶，它不但能直接作于纖維蛋白（A途徑），還能間接激活體內(nèi)纖溶酶原（B途徑）．如圖是有關(guān)納豆激酶溶栓機(jī)理簡(jiǎn)圖，請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題：
（1）研究NK直接水解作用：給定纖維蛋白平板，將

 

滴加其上，若出現(xiàn)相應(yīng)的溶解圈，則可說(shuō)明

 

．
（2）NK間接作用是通過(guò)

 

激活體內(nèi)纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓．
（3）請(qǐng)根據(jù)下列出示的實(shí)驗(yàn)材料，比較NK與內(nèi)源性纖溶酶哪種溶栓效果更好，并在下面橫線位置上，補(bǔ)全相應(yīng)內(nèi)容．
實(shí)驗(yàn)材料：NK溶液、內(nèi)源性纖溶酶溶液、纖維蛋白塊、緩沖液、量筒、試管和秒表．
實(shí)驗(yàn)步驟：

	加入物質(zhì)的成分	試管1	試管2
1	纖維蛋白塊	1g	1g
2	緩沖液	1mL	1mL
3	納豆激酶（NK）溶液	1mL	/
4		/	1mL

觀察記錄：觀察纖維蛋白塊分解情況，并記錄分解的

 

．請(qǐng)預(yù)測(cè)一種實(shí)驗(yàn)結(jié)果并分析：
（4）繼續(xù)研究NK的化學(xué)組成：因?yàn)榧{豆激酶存在于

 

（胞內(nèi)/胞外），可直接利用納豆菌的發(fā)酵液的上清液，進(jìn)一步

 

，鑒定其化學(xué)組成．
（5）由于NK在60℃時(shí)迅速失活，可通過(guò)

 

（現(xiàn)代生物技術(shù)）提高其熱穩(wěn)定性．

Answer 1

考點(diǎn)：酶在代謝中的作用的綜合,蛋白質(zhì)工程

專題：

分析：本題是對(duì)酶的作用和蛋白質(zhì)過(guò)程的綜合性考查，分析題圖納豆激酶降解纖維蛋白的過(guò)程和原理，然后根據(jù)問(wèn)題的具體要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)涉及和結(jié)果預(yù)期并得出相應(yīng)結(jié)論完成（1）、（2）、（3），梳理蛋白質(zhì)工程的知識(shí)完成（4）、（5）．

解答： 解：（1）由題圖可知，納豆激酶（NK）能直接作于纖維蛋白，使纖維蛋白原降解，研究NK直接水解纖維蛋白原的作用，可以在給定纖維蛋白平板上滴加納豆激酶，
若出現(xiàn)相應(yīng)的溶解圈，則可說(shuō)明，NK對(duì)纖維蛋白有直接水解作用或降解作用．
（2）由題圖可知，納豆激酶（NK）的間接作用是刺激血管上皮細(xì)胞，釋放溶酶原激活劑，活體內(nèi)纖溶酶原，增加纖溶酶的量和作用，溶解血栓．
（3）分析題意可知，本實(shí)驗(yàn)的目的是比較NK與內(nèi)源性纖溶酶哪種溶栓效果更好，實(shí)驗(yàn)的自變量的酶的種類，即NK與內(nèi)源性纖溶酶，自變量是蛋白塊消失的時(shí)間，因此步驟4加入的物質(zhì)是內(nèi)源性纖溶酶；：觀察纖維蛋白塊分解情況，并記錄分解的時(shí)間．
預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論：
①若試管1內(nèi)蛋白塊分解、消失的時(shí)間＜試管2，說(shuō)明NK溶液的溶栓（水解纖維蛋白）效果好于內(nèi)源性纖溶酶．
②若試管1內(nèi)蛋白塊分解、消失的時(shí)間＞試管2，說(shuō)明NK溶液的溶栓（水解纖維蛋白）效果差與內(nèi)源性纖溶酶．
③若試管1內(nèi)蛋白塊分解、消失的時(shí)間=試管2，說(shuō)明NK溶液（水解纖維蛋白）溶栓效果和內(nèi)源性纖溶酶一樣．
（4）由題意可知，納豆激酶存在于存在于細(xì)胞外，可直接利用納豆菌的發(fā)酵液的上清液，進(jìn)一步分離、提純，獲得，并對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行鑒定．
（5）通過(guò)蛋白質(zhì)工程（固定化酶、酶工程）提高納豆激酶的熱穩(wěn)定性．
故答案應(yīng)為：
（1）納豆激酶     NK對(duì)纖維蛋白有直接水解作用或降解作用（NK在體外有溶栓效果）  
（2）刺激血管上皮細(xì)胞，釋放溶酶原激活劑
（3）內(nèi)源性纖溶酶     時(shí)間  
若試管1內(nèi)蛋白塊分解、消失的時(shí)間＜試管2，說(shuō)明NK溶液的溶栓（水解纖維蛋白）效果好與內(nèi)源性纖溶酶．
（4）細(xì)胞外      分離、提純
（5）蛋白質(zhì)工程（固定化酶、酶工程）

點(diǎn)評(píng)：本題的知識(shí)點(diǎn)是酶的作用，蛋白質(zhì)過(guò)程，根據(jù)題圖分析出納豆激酶的作用和作用原理是解題的突破口，對(duì)于實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、�?shí)驗(yàn)自變量、因變量和實(shí)驗(yàn)涉及原則的分析是解題的關(guān)鍵．