Question

【題目】基因工程載體是DNA重組技術(shù)使用的基本工具�；卮鹣铝袉栴}

（1）大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來做基因工程中的載體，其主要優(yōu)點是_______________（至少兩項）�；�因工程中常使用的載體除質(zhì)粒外，還有_______________（至少兩項）。

（2）在進行基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進行人工改造過的。在構(gòu)建基因表達載體時，通過人工改造，基因表達載體中除了含有目的基因外，還必須有_____________________。構(gòu)建目的基因表達載體的目的一方面是使目的基因在受體細胞中_______________，并遺傳給下一代；另一方面，使目的基因能夠_______________，從而得到轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或生物。

（3）利用乳腺生物反應(yīng)器來生產(chǎn)基因工程藥物時，與藥用蛋白基因連在一起的是__________啟動子，這樣才能使該目的基因在乳腺細胞中表達。

（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的載體為____________，構(gòu)建此表達載體時，要將目的基因插入到質(zhì)粒的___________上，這樣就能夠通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用使目的基因進入植物細胞并插入到染色體中DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。

Answer 1

【答案】分子小，能自主復制，有標記基因，有多個酶切位點 λ噬菌體的衍生物、動植物病毒 啟動子、終止子和標記基因 穩(wěn)定存在 表達并發(fā)揮作用 乳腺蛋白基因 Ti質(zhì)粒 T—DNA

【解析】

運載體是基因工程進行所必須的工具，在進行目的基因的轉(zhuǎn)移時，常常需要將目的基因與運載體相結(jié)合，一般常用的運載體有質(zhì)粒，噬菌體和動植物病毒。目的基因建構(gòu)時，要保證形成的重組載體具有目的基因、啟動子、終止子和標記基因，識記基因工程的基本工具和操作步驟是本題的解題關(guān)鍵。

（1）基因工程中常使用的載體為質(zhì)粒，質(zhì)粒的優(yōu)點有：分子小，分子上有一個至多個限制酶切割位點，供外源DNA片段插入，質(zhì)�？稍诩毎�中進行自我復制，質(zhì)粒DNA分子上有特殊的標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；除質(zhì)粒外，λ噬菌體的衍生物、動植物病毒也是常用的基因工程載體；

（2）構(gòu)建的表達載體應(yīng)包括啟動子、終止子，以便驅(qū)動和停止轉(zhuǎn)錄，標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因；構(gòu)建目基因表達載體后，通過復制原點，目的基因一方面在受體細胞中穩(wěn)定存在，可以遺傳給下一代；同時，在啟動子的調(diào)控下，目的基因能夠表達和發(fā)揮作用，從而得到轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或生物；

（3）如果要利用乳腺生物反應(yīng)器來生產(chǎn)基因工程藥物，啟動子必須是乳腺蛋白基因的啟動子，這樣才能使該目的基因在乳腺細胞中表達；

（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的載體為Ti質(zhì)粒，它含有一段可轉(zhuǎn)移的DNA，這段DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體染色體的DNA上；構(gòu)建表達載體時，將目的基因插入到質(zhì)粒的T—DNA上，就能夠使目的基因進入植物細胞并插人到染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。