Question

6．干旱會影響農(nóng)作物產(chǎn)量，科學家們對此進行了研究．如圖為用探針檢驗某一抗旱植物基因型的原理，相關基因用R和r表示．

（1）在利用PCR技術擴增R或r基因的過程中，利用引物可尋找抗旱基因的位置并進行擴增．
（2）若被檢植株發(fā)生A現(xiàn)象，不發(fā)生B、C現(xiàn)象，則被檢植物的基因型為RR．
（3）用從基因文庫中獲取目的基因的方法獲取抗旱基因時需要用到限制酶，限制酶能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．
（4）經(jīng)檢測，抗旱基因已經(jīng)導入到煙草細胞，但未檢測出抗旱基因轉錄出的mRNA，從構建基因表達載體的角度推測，最可能的原因是基因表達載體上目的基因首端未加入啟動子．
（5）要快速繁殖轉基因抗旱煙草植株，目前常用的技術是植物組織培養(yǎng)，該技術的基本過程是：將離體的煙草細胞誘導脫分化形成愈傷組織，然后再分化出根和芽并發(fā)育成小植株．該技術在作物新品種的培育方面兩個最主要的應用是：突變體的利用和單倍體育種．

Answer 1

分析 1、細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結構和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程．細胞分化的實質(zhì)：基因的選擇性表達．
2、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等

解答 解：（1）用PCR技術擴增R或r基因時，需要用引物尋找抗旱基因的位置．
（2）被檢植物發(fā)生A現(xiàn)象，不發(fā)生B、C現(xiàn)象，即r探針沒有形成雜交環(huán)，所以被檢植物的基因型為RR．
（3）限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（4）經(jīng)檢測，抗旱基因已經(jīng)導入到煙草細胞，但未檢測出抗旱基因轉錄出的mRNA，從構建基因表達載體的角度推測，最可能的原因是基因表達載體上目的基因首端未加入啟動子．
（5）植物組織培養(yǎng)技術可快速繁殖抗旱煙草植株，該技術包括脫分化和再分化兩個基本過程，其中即將離體的煙草細胞誘導脫分化形成愈傷組織，然后再分化出根和芽并發(fā)育成小植株．該技術在作物新品種的培育方面兩個最主要的應用是：突變體的利用和單倍體育種．
故答案為：
（1）引物
（2）RR 
（3）磷酸二酯鍵
（4）基因表達載體上目的基因首端未加入啟動子
（5）植物組織培養(yǎng)        愈傷組織      單倍體育種

點評 本題考查細胞分化、基因工程等知識，要求考生識記細胞分化的概念，掌握細胞分化的實質(zhì)；識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題，能結合所學的知識準確答題．