Question

圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質粒的結構和部分堿基序列．現有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內切酶，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為C^↓CGG、G^↓GATCC、^↓GATC、CCC^↓GGG．下列分析中正確的是（　�。�

• A、若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產生2個粘性末端
• B、若單純?yōu)榱双@取目的基因，也可以選擇種限制酶MspⅠ
• C、若需將目的基因D導入圖2中的質粒，應選擇的限制酶是BamHⅠ
• D、為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基上需添加抗生素A和抗生素B

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析圖1：圖中DNA片段含有2個限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割位點，也含有兩個限制酶BamHⅠ和MboⅠ切割位點．基因D兩側序列為GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割．
分析圖2：質粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割．用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A．

解答： 解：A、限制酶SmaⅠ的識別序列為CCC^↓GGG，用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，能產生2個平末端，而不是黏性末端，故A錯誤；
B、限制酶MspⅠ的識別序列是C^↓CGG，在目的基因上，用該限制酶切割目的基因會破壞末端基因，所以為了獲取目的基因，不能選擇限制酶MspⅠ，而應選擇限制酶BamHⅠ，故B錯誤；
C、限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割會破壞目的基因，用限制酶MboⅠ切割會將質粒上的兩個標記基因都破壞，但在目的基因兩側和質粒上都含有限制酶BamHⅠ的識別序列，所以將目的基因D導入圖2中的質粒，應選擇的限制酶是BamHⅠ，故C正確；
D、用限制酶BamHⅠ切割破壞了抗生素A抗性基因，但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因，因此含有重組質粒的大腸桿菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A，所以為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基上需分別添加抗生素B和抗生素A，故D錯誤．

點評：本題考查基因工程操作的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點的能力；能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結論的能力．