Question

6．酵母菌與人類的關(guān)系密切，是一種單細(xì)胞真菌，在有氧和無氧環(huán)境下都能生存，屬于兼性厭氧菌，是工業(yè)上最重要，應(yīng)用最廣泛的一類微生物，在釀造、食品、醫(yī)藥工業(yè)等方面占有重要地位．
（1）在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌．酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18～25℃；在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制．
（2）野生酵母菌制酒效率低，為了篩選出高產(chǎn)酒精的酵母菌株，某生物興趣小組設(shè)計(jì)了實(shí)驗(yàn)方案（略），請(qǐng)回答有關(guān)問題：
①培養(yǎng)基的配制：常用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中需添加了青霉素，其目的是抑制細(xì)菌（放線菌）生長(zhǎng)；培養(yǎng)基滅菌前要將pH調(diào)至酸性．
②酵母菌的液體培養(yǎng)與計(jì)數(shù)：對(duì)培養(yǎng)液中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，常采用抽樣檢測(cè)的方法；發(fā)酵過程中檢測(cè)酵母菌數(shù)量可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)．
③酵母菌的分離純化：分離純化的方法很多，除平板劃線法外，稀釋涂布平板法也是一種常用的接種方法，這一方法常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，因?yàn)楫?dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．
（3）胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可從產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌菌體中提取獲得，流程如下：

萃取的效率主要取決于萃取劑的選擇和使用量，同時(shí)還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間等條件的影響；將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定．

Answer 1

分析 1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，條件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧．果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量；             
（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C₆H₁₂O₆$\stackrel{酶}{→}$2CO₂+2C₂H₅OH+能量．
2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，條件是30～35℃、一直需氧．果醋制作的原理：
當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿幔?/p>

解答 解：（1）溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18～25℃；在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制．
（2）①青霉素是廣譜性抗生素，能有效殺死細(xì)菌和放線菌，可選擇性培養(yǎng)真菌；培養(yǎng)真菌時(shí)，應(yīng)該將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性．
②對(duì)培養(yǎng)液中的酵母菌逐個(gè)計(jì)數(shù)是非常困難的，常采用抽樣檢測(cè)的方法；發(fā)酵過程中檢測(cè)酵母菌數(shù)量可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)．
③稀釋涂布平板法和平板劃線法是常用的接種方法，這兩種方法都可將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面，最終得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的菌落．要計(jì)數(shù)應(yīng)用稀釋涂布平板法．
（3）萃取的效率主要取決于萃取劑的選擇和使用量，同時(shí)還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間等條件的影響；將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定．
故答案為：
（1）18～25℃缺氧、呈酸性
（2）①抑制細(xì)菌（放線菌）生長(zhǎng) 　　酸性     　
②抽樣檢測(cè)       顯微鏡直接計(jì)數(shù)　
③稀釋涂布平板法　當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌
（3）萃取劑的選擇和使用量　紙層析

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合果酒和果醋制作流程圖，考查果酒和果醋的制作的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記參與果酒、果醋制作的微生物，掌握相關(guān)技術(shù)的原理及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．