Question

【題目】回答下列（一）、（二）兩小題

（一）大腸桿菌是生存在人體腸道中的正常菌群，每克糞便中含有109個，且能夠與致病菌混雜生長。如果食品和飲用水中出現(xiàn)大腸桿菌，就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌，因而常將大腸桿菌的數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測指標之一。請據(jù)此回答下列問題：

（1）大腸桿菌異化作用的類型是________，大腸桿菌在腸道中一般對人無害，但如果進入人的___________，就會對人體產(chǎn)生危害。

（2）測定街邊出售的奶茶中大腸桿菌的數(shù)目，常用涂布分離法進行測定。在操作過程中錯誤的是_______

A．將涂布器從70%酒精中取出后需放在酒精燈火焰上灼燒

B．涂布時需轉動培養(yǎng)皿以使涂布均勻

C．每一濃度需設多個培養(yǎng)皿進行涂布

D．也可以利用劃線分離法進行測定

（3）根據(jù)菌落測出的大腸桿菌數(shù)比實際數(shù)值要___(高、低)，原因是___________________。實驗完成后需要對培養(yǎng)基進行_________處理，然后才能倒掉。

（二）動物細胞培養(yǎng)的過程是：

組織→單個細胞的懸浮液→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)

（1）此過程的原理是_____________，將培養(yǎng)瓶放入____________培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)的條件除了充足的營養(yǎng)供給、適宜的溫度和氣體環(huán)境，還有____________。在培養(yǎng)的過程中_______（需要/不需要）再用胰蛋白酶。

（3）傳代培養(yǎng)得到的細胞系具有_______性。關于細胞系和細胞株下列說法錯誤的是______

A．原代培養(yǎng)得到的細胞也可以是細胞系

B．細胞系是具有特殊性質的細胞株

C．連續(xù)細胞系都獲得了不死性

D．連續(xù)細胞系不一定都發(fā)生了轉化

Answer 1

【答案】兼性厭氧型 泌尿系統(tǒng) D 低 培養(yǎng)基中可能有兩個或多個細菌緊挨在一起，共同形成一個菌落 滅菌 細胞增殖 二氧化碳培養(yǎng)箱 無菌、無毒 需要 異質 D

【解析】

1、常用的微生物接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法，兩者都可以用于菌種的分離，后者還可以用于菌種的計數(shù)。

2、動物細胞培養(yǎng)條件：

（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌、②添加一定量的抗生素、③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。
（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質。
（3）適宜的溫度和PH。
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。
3、細胞株：原代培養(yǎng)細胞傳至10代左右就不容易傳下去，細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞能存活傳到40～50代，這部分細胞稱為細胞株。細胞系：細胞株傳到50代左右不能再繼續(xù)傳代，部分細胞遺傳物質改變，具有癌變細胞的特點，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，這部分細胞稱為細胞系。

（一）（1）人體的腸道是一個無氧環(huán)境，大腸桿菌可在人體的腸道內生存，也能在食品和飲用水中出現(xiàn)，說明大腸桿菌的異化作用類型為兼性厭氧型。大腸桿菌在腸道中一般對人無害，但如果進入人的泌尿系統(tǒng)，就會對人體產(chǎn)生危害。

（2）A、涂布器滅菌時，將涂布器從70%酒精中取出后在火焰上引燃待酒精燃盡后，然后在酒精燈火焰旁冷卻8～10s再用，A正確；

B、涂布時，涂布器可以不動，可轉動培養(yǎng)皿，使涂布均勻，B正確；

C、每一濃度需設多個培養(yǎng)皿進行涂布，最后求多個培養(yǎng)皿上菌落的平均值，使實驗結果更準確，C正確；

D、劃線分離法不能用于計數(shù)，D錯誤。

故選D。

（3）由于培養(yǎng)基中可能有兩個或多個細菌緊挨在一起，共同形成一個菌落，所以根據(jù)菌落測出的大腸桿菌數(shù)比實際數(shù)值要低。實驗完成后需要對培養(yǎng)基進行滅菌處理，然后才能倒掉，以防止微生物污染環(huán)境。

（二）（1）動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞的增殖。二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環(huán)境，所以動物細胞培養(yǎng)時需將培養(yǎng)瓶放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)的條件除了充足的營養(yǎng)供給、適宜的溫度和氣體環(huán)境，還有無菌、無毒的環(huán)境。由于細胞增殖過程中會出現(xiàn)接觸抑制，所以在培養(yǎng)的過程中還需要再用胰蛋白酶處理，使組織細胞分散開。

（3）傳代培養(yǎng)的細胞會發(fā)生變異，具有異質性。

A、動物組織經(jīng)過機械消化或胰蛋白酶消化，可分散成單個的細胞；在細胞培養(yǎng)中，有原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)之分，傳代培養(yǎng)得到的連續(xù)細胞系大多數(shù)具有異倍體核型，原代培養(yǎng)物在首次傳代時就成為細胞系，A正確；

B、通過一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細胞株中獲得的具有特殊性質的細胞稱為細胞系，B正確；

C、能連續(xù)培養(yǎng)下去的細胞系稱為連續(xù)細胞系，其獲得了不死性，C正確；

D、連續(xù)細胞系被認為是發(fā)生了轉化的細胞系，D錯誤。

故選D。