Question

（15分）電影中，“蜘蛛俠”能產(chǎn)生高強度的蜘蛛絲，現(xiàn)實中的基因工程也創(chuàng)造出了“蜘蛛羊”，該羊的乳汁中含有蛛絲蛋白，高強度的蛛絲蛋白可用于許多重要的特種工業(yè)領(lǐng)域。請回答：

（1）為保證實驗成功，產(chǎn)生蛛絲蛋白的基因最好從 （基因組/cDNA)文庫中獲取。若要獲得大量的目的基因片段，可采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增過程需使用 酶。

（2）在構(gòu)建含蛛絲蛋白基因表達(dá)載體時，需使用的工具酶有限制酶和DNA連接酶，目的基因應(yīng)與 基因的啟動子等調(diào)控組件組合在一起，啟動子是 識別和結(jié)合的位點；構(gòu)建完成的基因表達(dá)載體需通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)人羊的 ，獲得重組細(xì)胞。

（3）若所得到的“蜘蛛羊”乳汁中沒有檢測到蛛絲蛋白，應(yīng)先采用 技術(shù)檢測“蜘蛛羊”乳腺細(xì)胞中是否含有 ；若已確認(rèn)此步成功，則應(yīng)該繼續(xù)檢測是否

Answer 1

（1）cDNA 熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）

（2）羊的乳腺蛋白 RNA聚合酶 受精卵

（3）DNA分子雜交 蛛絲蛋白基因（目的基因） 轉(zhuǎn)錄出了蛛絲蛋白的mRNA

【解析】

試題分析：（1）蛛絲蛋白基因是真核基因，為保證實驗成功，目的基因最好從cDNA文庫中獲取。PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增目的基因時需使用熱穩(wěn)定DNA聚合酶。

（2）根據(jù)題意，該基因工程中目的基因需要在羊的乳腺細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，所以構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需將目的基因與羊的乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件組合在一起；啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點；構(gòu)建完成的基因表達(dá)載體需通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)人羊的受精卵，獲得重組細(xì)胞。

（3）若所得到的“蜘蛛羊”乳汁中沒有檢測到蛛絲蛋白，應(yīng)先采用DNA分子雜交技術(shù)檢測“蜘蛛羊”乳腺細(xì)胞中是否含有目的基因；若已確認(rèn)此步成功，則應(yīng)該繼續(xù)檢測是否轉(zhuǎn)錄出了蛛絲蛋白的mRNA。

考點：本題考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力。