Question

3．植物的花藥培養(yǎng)在育種上有特殊的意義．植物組織培養(yǎng)可用于無病毒植株及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等方面．請回答相關(guān)問題．
（1）利用月季的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)時，為了保證培養(yǎng)的成功率通常選擇完全未開放的花蕾．確定花粉發(fā)育時期最常用的方法有醋酸洋紅法，但是對于花粉細(xì)胞核不易著色的植物，需采用焙花青一鉻礬法．
（2）進(jìn)行組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中常需要添加植物激素．欲有利于根的分化，添加的植物激素的種類及用量應(yīng)為生長素的用量與細(xì)胞分裂素的用量比值較高（生長素多于細(xì)胞分裂素）．
（3）無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，下列各項中使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒的是③⑥，采用灼燒方法進(jìn)行滅菌的是⑤．（填序號）
①培養(yǎng)皿　②培養(yǎng)基�、蹖嶒灢僮髡叩碾p手�、苋�角錐形瓶　⑤接種環(huán)�、藁ɡ�
（4）植物細(xì)胞中的果膠酶生產(chǎn)上有很廣泛的應(yīng)用，而且通過固定化技術(shù)可以大大提高酶的利用效率．
①果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶．
②若采用固定化技術(shù)對酶進(jìn)行固定，適合采用的方法是如圖中的BC（填字母）
③酵母菌也可以產(chǎn)生果膠酶，生產(chǎn)上通過固定化酵母細(xì)胞操作更為簡便，成本更低．在固定化酵母細(xì)胞時，酵母細(xì)胞需要首先進(jìn)行活化．后續(xù)操作中，如果觀察到凝膠珠顏色過淺，說明海藻酸鈉濃度偏低，固定酵母細(xì)胞較少．

Answer 1

分析 植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性．培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽最終形成植物體．影響植物細(xì)胞脫分化產(chǎn)生愈傷組織的一個重要因素是植物激素．植物激素中細(xì)胞分裂素和生長素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素．生長素和細(xì)胞分裂素的比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時，促進(jìn)愈傷組織的生長．

解答 解：（1）一般來說，在單核時期細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)成功率最高．為了選擇該期昀花藥，通常選擇完全未開放的花蕾．確定花粉發(fā)育時期最常用的方法是醋酸洋紅法，但是對于花粉細(xì)胞核不易著色的植物，需采用焙花青-鉻礬法，焙花青-鉻礬法藍(lán)黑色．
（2）進(jìn)行植物組織培養(yǎng)需配置MS培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中常需要添加生長素和細(xì)胞分裂素等植物激素．欲利于根的分化，植物激素的用量比例應(yīng)為生長素多于細(xì)胞分裂素．
（3）無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植物的重要因素，下列各項中使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒的對象為要保持活性的材料和實驗者自身，即實驗操作者的雙手和花蕾，采用灼燒方法進(jìn)行滅菌的是接種環(huán)．
（4）①果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶．
②固定化技術(shù)包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法（交聯(lián)法）；圖中A是包埋法，B是化學(xué)結(jié)合法，C是物理吸附法，由于細(xì)胞相對于酶來說更大，難以被吸附或結(jié)合，因此多采用包埋法；酶小容易從包埋的材料漏出，一般采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法．③酵母菌也可以產(chǎn)生果膠酶，生產(chǎn)上通過固定化酵母細(xì)胞操作更為簡便，成本更低．在固定化酵母細(xì)胞時，酵母細(xì)胞需要首先進(jìn)行活化．后續(xù)操作中，如果觀察到凝膠珠顏色過淺，說明海藻酸鈉濃度偏低，固定酵母細(xì)胞較少．
故答案為：
（1）完全未開放　    醋酸洋紅　   焙花青一鉻礬
（2）生長素的用量與細(xì)胞分裂素的用量比值較高（生長素多于細(xì)胞分裂素）
（3）③⑥⑤
（4）①果膠酯酶      ②BC   ③活化     海藻酸鈉濃度偏低，固定酵母細(xì)胞較少

點評 本題主要考查學(xué)生對植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識的記憶和理解能力．在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料．植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素；同時使用生長素和細(xì)胞分裂素時，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂也分化．消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌．