17.某生物興趣小組在學(xué)習(xí)了DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)后,嘗試開展RNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn).通過(guò)查閱資料,制訂了以下的實(shí)驗(yàn)方案:
【實(shí)驗(yàn)課題】酵母RNA的提取和鑒定
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.從酵母中提取RNA;2.鑒定RNA.
【實(shí)驗(yàn)原理】微生物是工業(yè)上大量生產(chǎn)RNA的原料,其中以酵母尤為理想,因?yàn)榻湍负怂嶂兄饕荝NA,DNA很少,菌體易收集,RNA易分離.RNA不溶于乙醇和無(wú)水乙醚.RNA熱穩(wěn)定性較蛋白質(zhì)強(qiáng).利用稀堿法(稀堿能使細(xì)胞壁溶解)或高鹽法(高濃度的鹽改變細(xì)胞膜的通透性)來(lái)釋放RNA.RNA水解液(加硫酸、加熱)+苔黑酚-FeCl3試劑加熱直到沸騰1分鐘,會(huì)呈現(xiàn)墨綠色.
【實(shí)驗(yàn)材料】干酵母粉、離心機(jī)、燒杯、試管、玻璃棒等;0.2%氫氧化鈉、95%乙醇、無(wú)水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3試劑等.
【實(shí)驗(yàn)步驟】
①稱6克干酵母
②加0.2%氫氧化鈉45mL,沸水加熱20分鐘,攪拌,后加乙酸7滴
③離心10分鐘后取上清液
④邊攪拌邊緩慢加95%乙醇并靜置10分鐘
⑤離心后先用95%乙醇洗兩次,再用無(wú)水乙醚洗兩次
⑥獲得RNA粗制品
⑦RNA鑒定
請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案,思考并回答下列問(wèn)題:
(1)酵母菌細(xì)胞中的RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中.酵母菌也是便于用來(lái)研究細(xì)胞呼吸不同方式的好材料,理由是酵母菌在有氧和無(wú)氧條件下都能生存,屬于兼性厭氧型.
(2)實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,離心后取沉淀物(填“上清液”或“沉淀物”)用乙醇、無(wú)水乙醚進(jìn)行洗滌.
(3)RNA提取過(guò)程要注意溫度的控制,在20~70℃的溫度范圍內(nèi)停留的時(shí)間不能太長(zhǎng),其原因是分解核酸的酶在此溫度范圍內(nèi)活性高,會(huì)使RNA降解;
(4)稀堿法提取RNA須在沸水浴中進(jìn)行的目的,一是使雜質(zhì)蛋白質(zhì)變性,二是使核酸水解酶失活,減少RNA的分解,以便獲得更多更純凈的RNA.
(5)若用花椰菜來(lái)提取DNA,可用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜,然后充分研磨,實(shí)驗(yàn)中研磨速度要緩慢.

分析 1、酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌體易收集,RNA易分離.
2、RNA不溶于乙醇和無(wú)水乙醚.
3、利用稀堿法(稀堿能使細(xì)胞壁溶解)或高鹽法(高濃度的鹽改變細(xì)胞膜的通透性)來(lái)釋放RNA.
4、RNA水解液(加硫酸、加熱)+苔黑酚-FeCl3試劑加熱直到沸騰1分鐘,會(huì)呈現(xiàn)墨綠色.

解答 解:(1)酵母菌中含有RNA的結(jié)構(gòu)有細(xì)胞核、核糖體(蛋白質(zhì)和RNA構(gòu)成)、線粒體、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)(RNA主要存在于細(xì)胞質(zhì)中).酵母菌在有氧和無(wú)氧條件下都能生存,屬于兼性厭氧型,所以是用來(lái)研究細(xì)胞呼吸不同方式的好材料.
(2)因?yàn)镽NA不溶于乙醇和無(wú)水乙醚,所以實(shí)驗(yàn)步驟⑤中,離心后取沉淀物(RNA)用乙醇、無(wú)水乙醚進(jìn)行洗滌.
(3)分解核酸的酶在20~70℃溫度范圍內(nèi)活性高,會(huì)使RNA降解,所以RNA提取過(guò)程中不能在此溫度范圍內(nèi)停留的時(shí)間不能太長(zhǎng).
(4)稀堿法提取RNA須在沸水浴進(jìn)行,因?yàn)楦邷貢?huì)使雜質(zhì)蛋白質(zhì)變性,同時(shí)使核酸水解酶失活,減少RNA的分解,這樣會(huì)獲得更多、更純凈的RNA.
(5)用植物細(xì)胞取DNA時(shí)需要研磨,但是研磨要緩慢;還需要進(jìn)入洗滌劑以瓦解細(xì)胞膜.
故答案為:
(1)細(xì)胞質(zhì)    酵母菌在有氧和無(wú)氧條件下都能生存,屬于兼性厭氧型
(2)沉淀物
(3)分解核酸的酶在此溫度范圍內(nèi)活性高,會(huì)使RNA降解
(4)使雜質(zhì)蛋白質(zhì)變性    使核酸水解酶失活,減少RNA的分解
(5)洗滌劑   緩慢

點(diǎn)評(píng) 此題考查酵母RNA的提取和鑒定,需要掌握實(shí)驗(yàn)的目的,流程及注意事項(xiàng),考查基礎(chǔ)全面,難度較大.

練習(xí)冊(cè)系列答案
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1944年,美國(guó)科學(xué)家艾弗里等人的肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(如下圖所示)說(shuō)明了( )

A. RNA是遺傳物質(zhì) B. 蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì)

C. DNA是遺傳物質(zhì) D. 核苷酸是遺傳物質(zhì)

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在微生物的培養(yǎng)中下列說(shuō)法不正確的是

A.培養(yǎng)基、手、接種針和超凈工作臺(tái)都需要使用恰當(dāng)方式進(jìn)行滅菌處理

B.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響

C.某一稀釋度的3個(gè)平板的菌落數(shù)依次為M1、M2、M3,以M2作為該樣品菌落估計(jì)值

D.制備固體培養(yǎng)基的操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題

5.關(guān)于生物組織中還原糖的鑒定,下列敘述正確的是( 。
A.可用本尼迪特試劑檢測(cè)溶液中蔗糖的有無(wú)
B.隔水加熱時(shí),試管中液體的液面應(yīng)低于燒杯中水的液面
C.在組織樣液中加入本尼迪特試劑后試管內(nèi)液體呈現(xiàn)無(wú)色,加熱后變成紅黃色
D.西瓜汁中含有豐富的還原糖,可作為生物組織中還原糖鑒定的材料

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:解答題

12.(1)下面起以洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料做實(shí)驗(yàn)得到的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象或結(jié)果,請(qǐng)據(jù)圖回答:
①圖1是利用洋蔥鱗片葉肉表皮細(xì)胞進(jìn)行的質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,實(shí)驗(yàn)時(shí)外界溶液是滴入少量紅墨水的0.3g/mL 的蔗糖溶液,那么圖中a、c兩處的顏色分別是無(wú)色、紅色,對(duì)原生質(zhì)層的描述是細(xì)胞膜和液泡膜以及兩層膜之間的細(xì)胞質(zhì).
②圖2是分離洋蔥管狀葉中色素得到的濾紙條,由該結(jié)果可知洋蔥管狀葉中ABCD.
A.色素的種類             B.不同色素在層析液中溶解度的相對(duì)大小
C.不同色素的相對(duì)含量      D.各種色素的顏色
(2)某研究小組為探宄影響過(guò)氧化氫分解的因素.做了三個(gè)實(shí)驗(yàn).相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示(實(shí)驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)2均在適宜條件下進(jìn)行.實(shí)驗(yàn)3其他條件適宜)請(qǐng)分析回答:

①實(shí)驗(yàn)1,2,3中的自變量分別為催化劑的種類、H2O2濃度、pH.
②實(shí)驗(yàn)2結(jié)果反映,在b、c所對(duì)應(yīng)的H2O2濃度范圍內(nèi),過(guò)氧化氫溶液濃度會(huì)不影響(填“升高”“降低”或“不影響”)過(guò)氧化氫酶的活性,bc段O2產(chǎn)生速率不再增大的原因最可能是酶的數(shù)量有限.
③實(shí)驗(yàn)1若溫度升高10℃,加過(guò)氧化氫酶的催化反應(yīng)曲線斜率將減。ㄌ睢霸龃蟆被颉皽p小”); 加Fe3+的催化反應(yīng)曲線斜率將增大(填“增大”或“減小”).
④實(shí)驗(yàn)3的結(jié)果顯示,過(guò)氧化氫酶的最適pH為e,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)pH小于d或大于f時(shí),過(guò)氧化氫酶的活性將永久喪失,其原因是酶的空間結(jié)構(gòu)被破壞.

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題

2.下列關(guān)于生物變異的敘述中,錯(cuò)誤的是(  )
A.基因突變不一定導(dǎo)致生物性狀發(fā)生改變
B.體細(xì)胞中含有兩個(gè)染色體組的個(gè)體不一定是二倍體
C.基因重組一般發(fā)生在受精作用的過(guò)程中,是生物變異的重要來(lái)源
D.與基因突變不同,染色體結(jié)構(gòu)變異可以在高倍鏡下觀察到

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:解答題

9.某研究性學(xué)習(xí)小組通過(guò)資料查找發(fā)現(xiàn):在15~35℃范圍內(nèi),酵母菌種群數(shù)量增長(zhǎng)較快.為了探究酵母菌種群增長(zhǎng)的最適溫度是多少,他們?cè)O(shè)置了5組實(shí)驗(yàn),每隔24h取樣檢測(cè)一次,連續(xù)觀察7天.表是他們進(jìn)行相關(guān)探究實(shí)驗(yàn)所得到的結(jié)果:(單位:×106個(gè)/mL)
溫度(℃)第1次第2次第3次第4次第5次第6次第7次第8次
0h24h48h72h96h120h144h168h
151.23.03.84.64.03.22.82.5
201.25.05.34.22.11.20.80.6
251.25.25.64.62.91.00.60.2
301.24.95.54.82.21.30.70.5
351.21.51.82.02.21.30.80.6
請(qǐng)據(jù)表分析回答下列問(wèn)題:
(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,每隔24小時(shí)取一定量的酵母菌培養(yǎng)液,用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并以多次計(jì)數(shù)的平均值估算試管中酵母菌種群密度,這種方法稱為抽樣檢測(cè)法.
(2)據(jù)表分析,酵母菌種群數(shù)量增長(zhǎng)的最適溫度約是25℃.
(3)每次計(jì)數(shù)時(shí),都應(yīng)將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液搖勻后再取樣,培養(yǎng)后期由于菌體數(shù)量過(guò)多,可將樣液稀釋后再計(jì)數(shù).在計(jì)數(shù)時(shí),按以下順序操作BAC(填字母),稍待片刻,待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部,再將計(jì)數(shù)板放在顯微鏡的載物臺(tái)上計(jì)數(shù).
A.吸管吸取培養(yǎng)液滴于蓋玻片邊緣  B.蓋玻片蓋放在計(jì)數(shù)室上   C.多余培養(yǎng)液用濾紙吸去
(4)為了使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確,需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)種類和濃度、pH等無(wú)關(guān)變量(至少兩點(diǎn)).同一溫度條件下,若提高培養(yǎng)液中酵母菌起始種群數(shù)量,則該組別中酵母菌到達(dá)K值的時(shí)間將減少(選填“增加”、“減少”或“保持不變”);若其他條件保持不變,適當(dāng)提高培養(yǎng)液的濃度,則該組別的K值將增加(選填“增加”、“減小”或“保持不變”).

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科目:高中生物 來(lái)源:2015-2016學(xué)年江蘇泰興一中高二下階段測(cè)試三生物試卷(解析版) 題型:選擇題

將大腸桿菌從菌種試管接種到另一支試管的操作,下列說(shuō)法有誤的一項(xiàng)是

A.整個(gè)接種過(guò)程都要在酒精燈的火焰附近進(jìn)行

B.接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒之后即可伸入菌種試管挑取少許菌種

C.菌種試管口和待接種的試管口接種前后都要通過(guò)酒精燈火焰2至3次

D.帶菌的接種環(huán)應(yīng)在培養(yǎng)基面上輕輕劃線

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:填空題

4.黃瓜開單性花且異花傳粉,株型有雌雄同株(E_F_)、雄株(eeF_)、雌株(E_ff或eeff).植株顏色受一對(duì)等位基因控制,基因型CC的植株呈綠色,基因型Cc的植株呈淺綠色,基因型cc的植株呈黃色,黃色植株在幼苗階段就會(huì)死亡.黃瓜植株的蛋白質(zhì)含量受另一對(duì)等位基因(Dd)控制,低含蛋白質(zhì)(D_)與高含蛋白質(zhì)(dd)是一對(duì)完全顯性的相對(duì)性狀,已知控制植株顏色基因、控制蛋白質(zhì)含量基因以及控制株型的基因均位于非同源染色體上.
欲用淺綠色低含蛋白質(zhì)的雌株(EEffCcDD)和淺綠色高含蛋白質(zhì)的雄株(eeFFCcdd)作親本,在短時(shí)間內(nèi)用簡(jiǎn)便方法培育出綠色高含蛋白質(zhì)雌雄同株的植株,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案如下:
(1)用上述親本雜交,F(xiàn)1中成熟植株的基因型是EeFfCCDd、EeFfCcDd.
(2)F1自交得F2.從F2中選出符合要求的綠色高含蛋白質(zhì)雌雄同株的植株.
(3)為檢測(cè)最后獲得的植株是否為純合子,可以用基因型為eeffCCdd植株作母本,做一次雜交實(shí)驗(yàn),預(yù)期結(jié)果及結(jié)論:
①若雜交后代均雌雄同株,則待測(cè)植株為純合子.
②若雜交后代出現(xiàn)雌株或者出現(xiàn)雄株,則待測(cè)植株為雜合子.
(4)某種植物有基因型不同的綠色子葉個(gè)體甲、乙,讓其分別與一純合黃色子葉的同種植物個(gè)體雜交,在每個(gè)雜交組合中,F(xiàn)1都是黃色子葉,再自花授粉產(chǎn)生F2,每個(gè)組合的F2的分離比如下:
甲:產(chǎn)生的F2中,黃:綠=81:175;
乙:產(chǎn)生的F2中,黃:綠=81:63.
本實(shí)驗(yàn)中,此種植物的子葉顏色至少受4對(duì)等位基因的控制.

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