Question

某生物興趣小組在學(xué)習(xí)完“蛋白質(zhì)的提取和分離”后，聯(lián)系相關(guān)實(shí)驗(yàn)，準(zhǔn)備從豬肝臟研磨液中初步提取過氧化氫酶，設(shè)計(jì)的“過氧化氫酶提取、分離流程圖”如圖：

試回答下列有關(guān)問題：
（1）向肝細(xì)胞懸液中加入一定量的pH=7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢�，可以破碎肝�?xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是

 

．與使用蒸餾水相比，使用緩沖液的優(yōu)點(diǎn)是

 

．
（2）蛋白質(zhì)粗分離階段透析的目的是

 

．
（3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的

 

等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離．
（5）實(shí)驗(yàn)小組以3%過氧化氫溶液和獲得的過氧化氫酶為材料進(jìn)行溫度對(duì)酶催化活性影響的探究，得到如圖所示的結(jié)果，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出“過氧化氫酶能耐受100℃高溫”的結(jié)論，請(qǐng)問這一結(jié)論是否可靠？為什么？

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：蛋白質(zhì)的提取和分離

專題：

分析：本題是對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)、探究溫度對(duì)酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)的綜合性考查，回憶血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)流程和原理、探究溫度對(duì)酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)過程中的自變量和因變量及無關(guān)變量，然后結(jié)合題干信息進(jìn)行解答．

解答： 解：（1）破碎肝細(xì)胞但是原理是肝細(xì)胞在低滲溶液中通過滲透作用吸水漲破，釋放出其中的過氧化氫酶；酶的活性受PH的影響，強(qiáng)酸或強(qiáng)堿會(huì)使酶的結(jié)構(gòu)改變而失去活性，與使用蒸餾水相比，使用緩沖液可以保證酶溶液pH基本穩(wěn)定，避免因pH變化影響過氧化氫酶活性．
（2）蛋白質(zhì)的粗分離方法采用透析法，由于透析袋是半透膜，可以讓小分子自由通過，而大分子物質(zhì)留在袋內(nèi)，因此可以通過透析除去分子量小的雜質(zhì)．
（3）電泳的原理是不同分子的帶電性質(zhì)的差異和分子本身的大小、形狀不同，導(dǎo)致帶電分子產(chǎn)生不同遷移速度，實(shí)現(xiàn)各種分子的分離．
（4）分析題干信息可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是探究溫度對(duì)酶催化活性影響，由于過氧化氫的分解速率受溫度的影響，溫度升高，過氧化氫本身的分解速率加快，因此用過氧化氫酶探究溫度對(duì)酶活性的影響，得出的結(jié)論是不科學(xué)的，圖中曲線100℃高溫，過氧化氫的分解速率較高，與酶無關(guān)，與溫度有關(guān)，此時(shí)過氧化氫酶已經(jīng)失去了活性．
故答案為：
（1）滲透原理（當(dāng)外界溶液濃度低于動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí)，細(xì)胞吸水脹破）  可以保證酶溶液pH基本穩(wěn)定，避免因pH變化影響過氧化氫酶活性  
（2）除去小分子化合物（雜質(zhì)）
（3）帶電性質(zhì)、分子大小、形狀 
（4）不可靠，高溫也能使過氧化氫分解

點(diǎn)評(píng)：對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)流程和原理、探究溫度對(duì)酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)過程中的自變量和因變量及無關(guān)變量的綜合理解應(yīng)用是本題考查的重點(diǎn)．