Question

【題目】(1)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，在電泳過程中，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素包括蛋白質(zhì)分子的________、________以及分子的形狀等。

(2)同學(xué)乙利用凝膠色譜法進(jìn)行血紅蛋白分離(如圖一)，他在操作中加樣的正確順序是________，在執(zhí)行圖一中②所示操作時(shí)，色譜柱下端連接的尼龍管應(yīng)該________(填“打開”或“關(guān)閉”)。

(3)圖二、圖三分別是同學(xué)甲、乙利用同一種樣品分離得到的結(jié)果，則在圖三中與圖二中蛋白質(zhì)P對(duì)應(yīng)的是________。

Answer 1

【答案】大小 帶電性質(zhì) ④①②③ 關(guān)閉 丙

【解析】

血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步，包括：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。首先通過洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到血紅蛋白溶液，即樣品的處理；再經(jīng)過透析去除分子量較小的雜質(zhì)，即樣品的粗分離；然后通過凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化；最后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。

（1）電泳時(shí)，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素有蛋白質(zhì)分子大小、帶電性質(zhì)及分子的形狀等。

（2）正確的加樣順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進(jìn)行分析，可以得出是④①②③；同時(shí)進(jìn)行②所示環(huán)繞加樣時(shí)，應(yīng)關(guān)閉下出口。

（3）SDS凝膠電泳裝置是垂直的裝置，此種電泳方法主要取決于蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，與電荷無關(guān)，同時(shí)加樣在“－”極，通電后，樣品蛋白質(zhì)向“＋”極移動(dòng)，相對(duì)分子量小的，移動(dòng)距離大，因此從圖二的電泳結(jié)果分析，P比N、M移向“＋”距離大，說明P的相對(duì)分子質(zhì)量比較小，因此洗脫出來的時(shí)間比較長，符合圖三中的丙。