Question

人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型常用于致病機(jī)理的探討及治療藥物的篩選．利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示．

（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用

 

酶短時(shí)處理大鼠組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞．
（2）卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可從已處死的雌鼠

 

中獲�。�
（3）圖中的高血壓相關(guān)基因作為

 

，質(zhì)粒作為

 

，二者需用

 

切割后連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上含有

 

有關(guān)．
（4）子代大鼠如果

 

和

 

，即可分別在分子水平和個(gè)體水平上說(shuō)明高血壓相關(guān)基因已成功表達(dá)，然后可用其建立高血壓轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型．
（5）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是

 

、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：1．卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)
主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精；第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞；第三種方法：是直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞，叫活體采卵．采集的卵母細(xì)胞，都要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精．
2．作為運(yùn)載體必須具備的條件：
①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存．②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入．③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇．④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)．
3．目的基因的檢測(cè)與鑒定，基因探針--用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段．
1）分子水平上的檢測(cè)
①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)
②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)
③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)
2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．（例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來(lái)鑒定棉花是否具有抗蟲特性．）

解答： 解：（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用胰蛋白酶短時(shí)處理大鼠組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞．
（2）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)，主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精．第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞；第三種方法：是直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞，叫活體采卵．
（3）本實(shí)驗(yàn)是制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠，高血壓相關(guān)基因與質(zhì)粒分別作為目的基因與載體．質(zhì)粒具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入．
（4）檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)或個(gè)體水平上的鑒定是否具有目的基因的相關(guān)的現(xiàn)狀，說(shuō)明高血壓相關(guān)基因以成功表達(dá)．
（5）由圖可知，在這技術(shù)上所用到的主要胚胎工程技術(shù)是體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植．
故答案為：
（1）胰蛋白酶
（2）卵巢
（3）目的基因    載體  限制酶   限制酶切割位點(diǎn)
（4）檢測(cè)到體內(nèi)有相關(guān)蛋白   出現(xiàn)高血壓
（5）體外受精

點(diǎn)評(píng)：本題考查了基因工程、胚胎工程的相關(guān)內(nèi)容，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用．