Question

1．干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受病毒感染后產(chǎn)生的一類糖蛋白，具有抗病毒、抑制腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性．回答下列問題：
（1）干擾素的作用機(jī)理是：干擾素作用于宿主細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體，激活細(xì)胞核中基因表達(dá)產(chǎn)生多種抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通過激活RNA酶使病毒的RNA水解；有些則可與核糖體（細(xì)胞器）結(jié)合，通過抑制病毒多肽鏈的合成發(fā)揮抗病毒作用．
（2）利用基因工程生產(chǎn)干擾素的方法之一是：利用DNA連接酶將干擾素基因與牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件連接在一起構(gòu)建基因表達(dá)載體，采用顯微注射的方法導(dǎo)入牛的受精卵細(xì)胞中，經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚期，移植入母體內(nèi)發(fā)育成熟，即可獲得能產(chǎn)生干擾素的轉(zhuǎn)基因牛．
（3）利用細(xì)胞工程也能生產(chǎn)干擾素，其設(shè)計(jì)思路是：將相應(yīng)的免疫細(xì)胞和瘤細(xì)胞利用電激、PEG、滅活的病毒等方法誘導(dǎo)融合，再利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量干擾素．由于干擾素在體外保存困難，可利用蛋白質(zhì)工程對(duì)干擾素進(jìn)行改造，基本途徑是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）根據(jù)酶的專一性原理，RNA酶能使RNA水解；多肽鏈的合成場(chǎng)所是核糖體．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要用DNA連接酶將目的基因與牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件連接在一起；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；胚胎移植時(shí)應(yīng)該選擇發(fā)育到桑椹胚或囊胚期的胚胎進(jìn)行移植．
（3）利用細(xì)胞工程也能生產(chǎn)干擾素，其設(shè)計(jì)思路是：將相應(yīng)的免疫細(xì)胞和瘤細(xì)胞利用電激、PEG、滅活的病毒 等方法誘導(dǎo)融合，再利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量干擾素．由于干擾素在體外保存困難，可利用蛋白質(zhì)工程對(duì)干擾素進(jìn)行改造，基本途徑是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列．
故答案為：
（1）RNA酶    核糖體
（2）DNA連接     顯微注射     桑椹胚或囊胚
（3）滅活的病毒     選擇     設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程、蛋白質(zhì)工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記蛋白質(zhì)工程的基本途徑；識(shí)記胚胎移植的基本程序，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．