Question

紅茶菌液是一種傳統(tǒng)的活菌飲料，能幫助消化，治療多種胃病．請根據(jù)制作流程回答問題：

（1）紅茶菌種是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生體，可以用

 

法分離純化得到不同的菌種．在接種活菌之前要將紅茶糖液先煮沸，目的是

 

，然后冷卻，以防止

 

．
（2）制備固定化酵母細胞時，首先要使酵母細胞處于

 

狀態(tài)．若在培養(yǎng)液中加入酸性的重鉻酸鉀溶液后，呈現(xiàn)

 

，證明已經(jīng)產生酒精．
（3）酵母細胞中蛋白質的提取和分離一般分為樣品處理、粗分離、純化和

 

四步．為了準確模擬生物體內的過程，保持細胞內外的pH一致，在樣品處理的透析階段，應將酵母蛋白溶液放人pH較低的

 

中．在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在，原因是氣泡會攪亂洗脫液中

 

，降低分離效果．
（4）當

 

、糖源都充足時，醋酸菌將培養(yǎng)液中的糖分解為醋酸；在利用乳酸菌制備泡菜時，需要測定亞硝酸鹽的含量，在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與

 

發(fā)生重氮化反應后，與N-I-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成

 

色染料．

Answer 1

考點：微生物的利用,制備和應用固相化酶,蛋白質的提取和分離

專題：

分析：分離菌種常用稀釋涂布或平板劃線法．煮沸是清除培養(yǎng)液中雜菌，冷卻是防止高溫殺死紅茶菌種；檢測酒精可用橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇（酒精）發(fā)生化學反應，在酸性條件下，變成灰綠色．蛋白質的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定，醋酸菌為好氧性細菌，故需在氧氣充足的條件下將葡萄糖分解為醋酸，測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮反應后，然后與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料．

解答： 解：（1）分離菌種常用稀釋涂布或平板劃線法．在接種之前，紅茶糖液要先煮沸后冷卻，煮沸是清除培養(yǎng)液中雜菌，冷卻是防止高溫殺死紅茶菌種
（2）制備固定化酵母細胞時，首先要使酵母細胞從休眠狀態(tài)恢復到正常狀態(tài)，即活化過程．檢測酒精可用橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇（酒精）發(fā)生化學反應，在酸性條件下，變成灰綠色．
（3）蛋白質的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定，純度鑒定可用電泳法．氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果
（4）醋酸菌為好氧性細菌，故需在氧氣充足的條件下將葡萄糖分解為醋酸，測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮反應后，然后與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量
故答案為：
（1）稀釋涂布平板（或平板劃線）  清除培養(yǎng)液中的雜菌    高溫殺死紅茶菌種
（2）活化  灰綠色
（3）純度鑒定   緩沖液  蛋白質的洗脫次序
（4）氧氣  對氨基苯磺酸  玫瑰紅

點評：本題考查了微生物的培養(yǎng)和應用的知識，意在考查學生的應用和實驗探究能力，試題難度中等．