Question

5．研究人員成功地從土壤中篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物．
（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶．
（2）如果要對(duì)土壤中的纖維素分解茵進(jìn)行計(jì)數(shù)，常采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種培養(yǎng)，接種工具采用灼燒滅菌的方法．
（3）常用的剛果紅染色法有兩種：第一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)；第二種是在倒平板時(shí)就加人剛果紅．第一種（選答“第一種”或“第二種”）方法會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜．
（4）如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，說明可能獲得了纖維素分解茵．為了確定是纖維紊分解茵，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)．纖維素酶的測(cè)定方法一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定．

Answer 1

分析 在纖維素分解菌的分離實(shí)驗(yàn)中，剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，這樣可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．
剛果紅染色法有兩種：
1．先培養(yǎng)微生物再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)
優(yōu)點(diǎn)：顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用
缺點(diǎn)：操作繁瑣，加入的剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜
2．在倒平板時(shí)就加入剛果紅
優(yōu)點(diǎn)：不存在菌落的混雜問題
缺點(diǎn)：①在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)
②有些微生物有降解色素的功能

解答 解：（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶，其中C₁酶和C_X酶能使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶能將纖維二糖分解成葡萄糖．
（2）對(duì)土壤中的纖維素分解菌的計(jì)數(shù)常采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種培養(yǎng)，接種工具常用灼燒滅菌的方法．
（3）剛果紅不與纖維二糖和葡萄糖發(fā)生反應(yīng)，第一種方法是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，操作繁瑣，加入的剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；第二種方法在倒平板時(shí)加入剛果紅，不會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜．
（4）剛果紅與纖維素反應(yīng)呈紅色，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶會(huì)將纖維素分解而不能與剛果紅染液呈紅色，在菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈．為了確定是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)．纖維素酶的測(cè)定方法一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定．
故答案為：
（1）葡萄糖苷
（2）稀釋涂布平板    灼燒
（3）倒平板   第一種
（4）透明圈    發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶    葡萄糖

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查兩種篩選纖維素分解菌的方法，意在加強(qiáng)學(xué)生對(duì)纖維素分解菌的分離與篩選過程的掌握，試題難度一般．