【題目】用噬菌體抗體庫技術(shù)獲得人的單克隆抗體的方法是:將人抗體基因插入噬菌體載體,然后讓該噬菌體感染大腸桿菌,抗體可能和噬菌體蛋白以融合蛋白的形式附著在噬菌體表面,也可能通過大腸桿菌分泌出去。回答下列問題:

(1)獲取人抗體基因時,可從人的_________細胞中獲取總RNA,反(逆)轉(zhuǎn)錄成cDNA,再通過PCR技術(shù)擴增抗體基因。在PCR反應(yīng)體系中,需加入________作為合成DNA的原料。

(2)在抗體基因與噬菌體基因之間設(shè)計了一個終止密碼子(UAA或UAG或UGA)的對應(yīng)序列,在終止密碼子突變型的菌株表達時,抗體基因的表達產(chǎn)物是_______(填“融合蛋白”或“分泌型抗體”)。

(3)下圖表示噬菌體抗體庫中編碼某抗體的mRNA的部分堿基序列:

圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含__________個密碼子,如虛線框后的序列未知,預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有________種。

(4)在噬菌體抗體庫的構(gòu)建過程中,理論上可以不利用Ca2+處理大腸桿菌,依據(jù)是___________。與利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體相比,用該技術(shù)省去的步驟是__________,使制備更簡單易行。從噬菌體抗體庫中篩選特異性抗體的方法是__________。

【答案】漿 四種脫氧核苷酸 融合蛋白 8 13 噬菌體可以侵染大腸桿菌,將重組DNA分子注入大腸桿菌 動物細胞融合(或已免疫的B細胞與骨髓瘤細胞融合或漿細胞與骨髓瘤細胞融合) 抗原—抗體雜交(法)

【解析】

本題主要考查基因工程和細胞工程與單克隆抗體制備的相關(guān)知識,要求學生熟知基因工程的操作過程、以及單克隆抗體的制備的過程,旨在考查考生的理解能力與知識的綜合運用能力。

(1)抗體基因在效應(yīng)B細胞(漿細胞)中表達,故應(yīng)從人的漿細胞中獲取總RNA,反(逆)轉(zhuǎn)錄成cDNA,再通過PCR技術(shù)擴增抗體基因;DNA的原料為四種脫氧核苷酸;

(2)在抗體基因與噬菌體基因之間設(shè)計了一個終止密碼子(UAG)的對應(yīng)序列,終止密碼子為翻譯的終點,由于終止密碼子突變型菌株轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物無原來設(shè)計的終止密碼子,因此抗體基因的表達產(chǎn)物是融合蛋白(抗體和噬菌體的蛋白質(zhì));

(3)mRNA上三個相鄰堿基為一個密碼子,故圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含8個密碼子;該片段后面的第一個堿基為U,所以后面的密碼子最多可能為4×4=16種,根據(jù)題干信息及題中給出的mRNA序列可知,虛線框后第一個密碼子不可能是終止密碼子,故實際上最多有16-3=13種密碼子;

(4)Ca2+處理大腸桿菌的目的是使大腸桿菌易于吸收周圍環(huán)境中的DNA分子,但由于噬菌體可以侵染大腸桿菌,可將重組DNA分子注入大腸桿菌,因此在噬菌體抗體庫的構(gòu)建過程中,理論上可以不利用Ca2+處理大腸桿菌;利用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的單克降抗體,需要對骨髓瘤細胞和B淋巴細胞進行融合,然后篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞,但用噬菌體抗體庫技術(shù)獲得人的單克隆抗體省去了動物細胞融合環(huán)節(jié),使制備更簡單易行;從噬菌體抗體庫中篩選特異性抗體的方法是抗原—抗體雜交(法)。

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【題目】如圖是紙層析法分離葉綠體中色素的裝置圖,層析后得到不同的色素帶,能吸收紅光的色素帶是( )

A.①② B.②③ C.③④ D.①④

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【題目】如圖中曲線Ⅰ、Ⅱ分別表示物質(zhì)A在無催化劑條件和有酶催化條件下生成物質(zhì)P所需能量的變化過程。下列相關(guān)敘述錯誤的是(

A.a段與b段之和表示在無催化劑的條件下,物質(zhì)A生成物質(zhì)P需要的活化能

B.圖中b段表示酶降低的活化能

C.若曲線Ⅱ為最適酶促條件下的曲線,改變反應(yīng)條件后,a段的高度將升高

D.若將Ⅰ改為無機催化劑催化該反應(yīng),則b段的高度將升高

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【題目】某實驗小組將載有水綿和好氧細菌X的臨時裝片放置在密閉且透明的小室中,暗處理一段時間后,再用自然光透過三棱鏡照射臨時裝片,細菌X在不同光區(qū)的聚集情況如下圖所示。請回答下列問題:

(1)實驗開始的一段時間,暗處理的目的是_______。根據(jù)實驗結(jié)果分析,細菌X主要密集分布在波長為400~450nm和650~700nm的光區(qū),原因是__________。

(2)該實驗小組從綠葉中提取了類胡蘿卜素,請設(shè)計一組實驗來驗證類胡蘿卜素主要吸收藍紫光(用以上實驗為對照組,補充完整以下實驗方案)。

實驗步驟:在三棱鏡之前放置裝有足夠量的________的試管,再用自然光透過試管和三棱鏡照射水綿的臨時裝片;

預(yù)期結(jié)果:與對照組相比,若_______,則可驗證類胡蘿卜素主要吸收藍紫光。

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【題目】如圖為某物質(zhì)(●)跨膜運輸?shù)氖疽鈭D。下列相關(guān)敘述錯誤的是( 。

A. 載體①逆濃度運輸該物質(zhì)

B. 載體②在運輸物質(zhì)過程中不耗能

C. 載體①和②運輸方式不同

D. 該物質(zhì)可能是O2

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【題目】如圖為DNA的平面結(jié)構(gòu),虛線表示堿基間的氫鍵。請據(jù)圖回答:

1)從主鏈上看,兩條單鏈______平行;從堿基關(guān)系看,兩條單鏈____________

2____________交替連接,構(gòu)成了DNA分子的基本骨架。

3)圖中有______種堿基。

4)圖中的AATP中的A的區(qū)別是____________。

5)與該圖中的DNA片段大小相同的DNA最多有______種。

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【題目】下列過程存在基因重組的是( 。

A. ①②B. ②④C. ③⑤D. ①④

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【題目】神經(jīng)纖維受到剌激時,細胞膜的變化是

A. Na+的通透性增加,Na+內(nèi)流 B. Na+的通透性增加,Na+外流

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【題目】牛奶中富含蛋白質(zhì),長期飲用有助于增強體質(zhì),但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體。國家標準是每毫升牛奶中細菌數(shù)小于30 000個,以下是牛奶消毒及細菌檢測實驗。

(1)圖中步驟①稱為____________消毒法,步驟②是____________

(2)進行步驟③操作時,應(yīng)選用下列中的哪種工具?__________________。為了避免雜菌污染,此步驟應(yīng)在____________附近進行。

(3)將接種后的培養(yǎng)基和作為對照的____________同時放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)36小時。取出后統(tǒng)計各平板的菌落數(shù),結(jié)果如下表所示。應(yīng)該選擇其中稀釋倍數(shù)為____________的平板進行計數(shù),經(jīng)過消毒后的牛奶,細菌數(shù)_________(是/否)符合國家標準。該法測得的細菌數(shù)一般比實際結(jié)果偏_________,原因是____________________________________。

牛奶稀釋倍數(shù)

10-2

10-3

10-4

平板1菌落數(shù)

87

10

1

平板2菌落數(shù)

83

12

1

平板3菌落數(shù)

85

10

0

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