Ⅰ.苯胺是致癌物質(zhì)，土壤中有分解苯胺的異養(yǎng)型細(xì)菌，下表是篩選分解苯胺的異養(yǎng)型細(xì)菌的培養(yǎng)基配方。

(1)此培養(yǎng)基中的成分X除了為目的菌提供能源外，還能提供________________

和 ，該培養(yǎng)基從作用看屬于 。

(2)下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖。則獲得圖A效果的接種方法是 __________________________________________________

_________________________________________________________________ ，

圖B效果的接種方法是 ________________________________________________

_________________________________________________________________ 。

Ⅱ.根據(jù)植物組織培養(yǎng)和生物有效成分的提取的知識(shí)回答下列問題：

(1)菊花的組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是 ，原理是 。

(2)從茶籽中提取茶油最好采用 法，工業(yè)上提取胡蘿卜素一般采用萃取法，鑒定該色素的方法是 法。

胡蘿卜素分為α、β、γ三類，它廣泛存在于植物各組織器官中，請(qǐng)結(jié)合從胡蘿卜中提取胡蘿卜素的流程示意圖回答下面的問題：

胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素

(1)胡蘿卜素易溶于 ，對(duì)提取胡蘿卜素的溶劑的要求有三點(diǎn)：一要具有較 (選填“高”或“低”)的沸點(diǎn)，二要能夠充分溶解胡蘿卜素，三要 。

(2)流程中對(duì)胡蘿卜粉碎的意義是_______________ 。干燥的意義是 。

(3)如圖1是某同學(xué)設(shè)計(jì)的紙層析法鑒定胡蘿卜素粗品的實(shí)驗(yàn)裝置圖，圖2是胡蘿卜素層析結(jié)果示意圖。請(qǐng)結(jié)合圖解回答：

①圖1裝置的一個(gè)明顯錯(cuò)誤是 ________________________________________；

在實(shí)驗(yàn)時(shí)，一位同學(xué)把樣品原點(diǎn)浸入到了溶劑內(nèi)，結(jié)果他沒有得到圖2所示的結(jié)果，原因是 。

②在濾紙上點(diǎn)樣時(shí)要求用最細(xì)的注射器點(diǎn)樣，并要在每次點(diǎn)樣后用吹風(fēng)機(jī)吹干，其目的是 。

③點(diǎn)樣時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)點(diǎn)在圖2中的 處。

低溫蛋白酶是海洋嗜冷細(xì)菌分泌的酶類，最適溫度在20℃左右，作為洗衣粉添加劑可在較低的溫度下達(dá)到理想的洗滌效果。下圖為分離可分泌低溫蛋白酶的某種嗜冷菌的操作步驟，據(jù)圖回答問題：

(1)分裝前，對(duì)培養(yǎng)基要進(jìn)行 操作。為避免雜菌污染，要及時(shí)進(jìn)行 操作。

(2)將擴(kuò)大培養(yǎng)后的深海微生物用 法接種到含酪蛋白的固體培養(yǎng)基表面，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，挑出形成透明圈的單一菌落，即為初選出的嗜冷菌。從嗜冷菌分泌的蛋白質(zhì)中分離出低溫蛋白酶的最常用的方法是 。

(3)為進(jìn)一步檢測(cè)分離出的低溫蛋白酶的最適溫度，將該菌按上圖所示分5組分別置于 中進(jìn)行培養(yǎng)， 組所對(duì)應(yīng)的溫度為最適溫度。

(4)為提高酶的利用率，可以采用 技術(shù)，常用的方法有 ____________。

根據(jù)相關(guān)知識(shí)，回答胡蘿卜素提取和酶應(yīng)用方面的問題：

(1)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和 ，以提高萃取效率；水蒸氣蒸餾法 (填“適合”或“不適合”)胡蘿卜素的提取，原因是 ___________________________________

__________________________________________________________________；

鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，通常可采用 法，并以_______ 樣品作為對(duì)照。

(2)若要提高衣物上血漬的去除效果，可在洗衣粉中加入____________________

酶，因?yàn)樵撁改軐⒀�紅蛋白水解成可溶性的 或 ；若要提高衣物上油漬的去除效果，洗衣粉中可添加 酶；使用加酶洗衣粉時(shí)，水溫過低或過高時(shí)洗滌效果不好的原因分別是 ________________

_________________________________________________________________。

煙草花葉病毒(TMV)是一種在煙草及蔬菜等經(jīng)濟(jì)作物中廣泛傳播的病毒，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法將煙草花葉病毒外殼蛋白基因(CP基因)導(dǎo)入煙草并在轉(zhuǎn)化的煙草植株中表達(dá)，使其獲得對(duì)煙草花葉病毒的抗性。下圖是轉(zhuǎn)化煙草植株的培育流程，請(qǐng)回答：

(1)含有CP基因的cDNA文庫是通過將TMV的RNA進(jìn)行 獲得的。在對(duì)cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，設(shè)計(jì)的引物自身不能含有 序列。

(2)將CP基因?qū)�入土壤農(nóng)桿菌質(zhì)粒的 ，其原因是 __________________

_________________________________________________________________ 。

(3)含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌與煙草葉共培養(yǎng)過程中，對(duì)煙草葉的處理要求是 ________________________________________。

(4)用含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染煙草葉成功后，共培養(yǎng)形成愈傷組織時(shí)的培養(yǎng)條件是必須 。

(5)在誘導(dǎo)芽、根的培養(yǎng)基中需添加 才能進(jìn)行篩選，并要注意在不同的培養(yǎng)階段需調(diào)整 的比例。

某竹芋科植物果實(shí)中含有一種甜蛋白，其甜度為蔗糖的三千倍，是理想的甜味劑。某研究小組試圖把甜蛋白基因(目的基因)導(dǎo)入黃瓜中，以改良這種黃瓜的品質(zhì)。獲得轉(zhuǎn)基因黃瓜植株的流程圖如下，請(qǐng)回答：

(1)通過步驟①和②可人工合成目的基因，在步驟②中先以mRNA為模板在______

酶的作用下合成互補(bǔ)DNA，然后通過一系列實(shí)驗(yàn)從中篩選出 基因。此外，還可以根據(jù)甜蛋白的氨基酸序列推測(cè)出 序列，再用 合成。

(2)通過 技術(shù)，可以獲得大量目的基因。利用該技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成 。

(3)導(dǎo)入了目的基因的葉片組織細(xì)胞經(jīng)過步驟③ 和④_______

后形成了完整的植株，說明 。

(4)可以通過 技術(shù)檢測(cè)黃瓜植株中是否含有甜蛋白。

下圖為單克隆抗體制備流程示意圖。

(1)單克隆抗體制備技術(shù)的基礎(chǔ)是 。

(2)細(xì)胞融合是隨機(jī)的過程，在HAT培養(yǎng)基上培養(yǎng)，目的是 。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機(jī)鹽，但要注意無機(jī)鹽的 ，以保證生命活動(dòng)的正常進(jìn)行。

(3)為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1 mL細(xì)胞稀釋液，其目的是 _____________

_________________________________________________________________ 。

(4)若用15N標(biāo)記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞，放射性物質(zhì)在細(xì)胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是 _______________________________________________

_________________________________________________________________ 。

胚胎移植的基本程序如下圖(以牛胚胎移植為例)，請(qǐng)據(jù)圖回答問題：

(1)對(duì)供體母牛、供體公牛的要求是 。

(2)同期發(fā)情處理的方法是 ，沖卵中的“卵”是指 。

(3)受精有關(guān)過程有：①第一次卵裂開始，②釋放第二極體，③頂體反應(yīng)，④穿越透明帶，⑤雌、雄原核的形成，⑥核膜消失，雌、雄原核融合。其正確的順序?yàn)? (填序號(hào))，受精的標(biāo)志是 。

(4)若供體母牛具有許多優(yōu)良性狀，可利用體細(xì)胞克隆技術(shù)加速遺傳改良進(jìn)程，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

①目前核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是 。

②用于核移植的體細(xì)胞一般選用 代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是 。

從世界上第一位“試管嬰兒”誕生，至今全球試管嬰兒數(shù)量已達(dá)到400萬。從克隆羊“多利”誕生，至今已成功克隆了多種動(dòng)物。請(qǐng)分析回答試管嬰兒與克隆技術(shù)的有關(guān)問題：

(1)試管嬰兒和克隆動(dòng)物的培育過程中均會(huì)用到的生物技術(shù)有 、 。

(2)試管嬰兒和克隆動(dòng)物的生殖方式分別屬于_____________________________

和 。

(3)培育試管嬰兒時(shí)，可通過給母體注射 增加排卵數(shù)量，從父親體內(nèi)獲得的精子需要進(jìn)行 處理，才能完成受精作用。

(4)克隆動(dòng)物時(shí)，將甲個(gè)體的細(xì)胞核移入乙個(gè)體去核的卵母細(xì)胞中，由重組細(xì)胞培育成個(gè)體丙，則個(gè)體丙的基因來源于 __________________________________

_________________________________________________________________ 。

(5)請(qǐng)列舉一例克隆技術(shù)在醫(yī)療方面的應(yīng)用： 。

由李建遠(yuǎn)教授率領(lǐng)的科研團(tuán)隊(duì)，在山東煙臺(tái)毓璜頂醫(yī)院成功克隆出5枚符合國(guó)際公認(rèn)技術(shù)鑒定指標(biāo)的人類囊胚。請(qǐng)回答下列問題：

(1)在卵子去核的過程中，李建遠(yuǎn)教授采用三維立體偏震光紡錘體成像系統(tǒng)，對(duì)核DNA精確定位后，再用微激光主要對(duì)卵子的第一屏障打孔，才能精確剔除卵子細(xì)胞核。這一屏障是指 ( )

A.卵細(xì)胞膜 B.透明帶 C.核膜

(2)在培養(yǎng)皮膚纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞時(shí)，需要用胰蛋白酶等處理，目的是 。培養(yǎng)過程中除了保證無菌、無毒的環(huán)境外，為了防止污染通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的 。

(3)通過克隆胚胎進(jìn)而用其衍生而來的器官取代患者病變的器官，就會(huì)避免免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生，根本原因是 。

(4)獲得目的基因后可采用 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。大部分物種的基因能拼接在一起，是因?yàn)? 。檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入植物細(xì)胞，可采用的生物技術(shù)是 。