Question

低溫蛋白酶是海洋嗜冷細(xì)菌分泌的酶類，最適溫度在20℃左右，作為洗衣粉添加劑可在較低的溫度下達(dá)到理想的洗滌效果。下圖為分離可分泌低溫蛋白酶的某種嗜冷菌的操作步驟，據(jù)圖回答問題：

(1)分裝前，對培養(yǎng)基要進(jìn)行 操作。為避免雜菌污染，要及時進(jìn)行 操作。

(2)將擴(kuò)大培養(yǎng)后的深海微生物用 法接種到含酪蛋白的固體培養(yǎng)基表面，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，挑出形成透明圈的單一菌落，即為初選出的嗜冷菌。從嗜冷菌分泌的蛋白質(zhì)中分離出低溫蛋白酶的最常用的方法是 。

(3)為進(jìn)一步檢測分離出的低溫蛋白酶的最適溫度，將該菌按上圖所示分5組分別置于 中進(jìn)行培養(yǎng)， 組所對應(yīng)的溫度為最適溫度。

(4)為提高酶的利用率，可以采用 技術(shù)，常用的方法有 ____________。

 

Answer 1

(1)調(diào)pH 高壓蒸汽滅菌

(2)稀釋涂布平板(或平板劃線)

電泳法(凝膠色譜法)

(3)恒溫箱 透明圈與菌落直徑比值最大

(4)固定化酶 化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法

【解析】(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基需要適宜的pH，因此制備培養(yǎng)基時應(yīng)在分裝前調(diào)pH，然后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。

(2)微生物的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法，分離低溫蛋白酶可以采用電泳法(凝膠色譜法)。

(3)微生物的培養(yǎng)需要適宜的溫度，因此應(yīng)在恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。含有酪蛋白的培養(yǎng)基不透明，酪蛋白被低溫蛋白酶分解后可形成透明圈，透明圈與菌落直徑的比值反映了嗜冷菌分泌低溫蛋白酶的能力。因此應(yīng)挑選透明圈與菌落直徑比值最大的菌體。

(4)采用固定化酶技術(shù)可以實現(xiàn)酶的回收利用，因此可以提高酶的利用率。固定化酶常用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。