Question

回答下列有關(guān)生物工程的問題．
下表是基因工程中幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)；圖2是轉(zhuǎn)基因香蕉的培育過程，含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)．

（1）圖1是用限制酶

 

進(jìn)行切割得到的目的基因，可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后

 

．
（2）從圖2中反映質(zhì)粒作為運(yùn)載體的特點(diǎn)是

 

．基因工程中還可以用

 

作為運(yùn)載體．
（3）圖2中構(gòu)建重組質(zhì)粒不能使用SmaI酶切割的原因是

 

．
（4）圖2中④表示組織培養(yǎng)過程中的

 

，它對(duì)植物激素調(diào)節(jié)的要求是

 

．
（5）圖2中的農(nóng)桿菌是基因工程中的

 

．判斷該轉(zhuǎn)基因工程是否成功的依據(jù)是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的應(yīng)用

專題：

分析：分析題圖：含目的基因的DNA和質(zhì)粒上均有salⅠ、HindⅢ、BamHⅠ、EcoRⅠ酶切位點(diǎn)，但SmaI酶切位點(diǎn)位于目的基因和標(biāo)記基因上，切割會(huì)破壞目的基因，EcoRⅠ酶切割質(zhì)粒自身環(huán)化，用BamHI 和HindⅢ酶對(duì)外源DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割．圖中①是構(gòu)建基因表達(dá)載體；②③是利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④和⑤表示植物組織培養(yǎng)，原理是香蕉組織細(xì)胞具有全能性，其中④表示脫分化，⑤表示再分化，培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素．

解答： 解：（1）構(gòu)建含目的基因的重組質(zhì)粒A時(shí)，選用 BamHI 和HindⅢ酶對(duì)外源DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割，這樣使目的基因兩端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，同理，也可以防止質(zhì)粒自身環(huán)化．
（2）質(zhì)粒作為運(yùn)載體的特點(diǎn)是有多個(gè)酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存；還常用噬菌體或動(dòng)植物病毒（或病毒）作為運(yùn)載體．
（3）質(zhì)�？股�素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，由圖可知，標(biāo)記基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位點(diǎn)，都可以被SmaI酶破環(huán)，故不能使用該酶剪切質(zhì)粒和含有目的基因的DNA．
（4）圖2中④表示組織培養(yǎng)過程中的脫分化，植物激素調(diào)節(jié)的要求是生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素濃度的比值約為1．
（5）圖2中的農(nóng)桿菌是基因工程中的含目的基因的受體；判斷該轉(zhuǎn)基因工程是否成功的依據(jù)是該目的基因在香蕉中是否成功表達(dá)．
故答案為：（1）BamH I和Hind III    自身環(huán)化
（2）有多個(gè)酶切位點(diǎn)、有標(biāo)記基因、能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存（至少寫2點(diǎn)）噬菌體或動(dòng)植物病毒（或病毒）
（3）SmaI酶會(huì)破壞目的基因和質(zhì)粒
（4）去分化    生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素濃度的比值約為1
（5）含目的基因的受體       該目的基因在香蕉中是否成功表達(dá)．

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程和植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生對(duì)基因工程的相應(yīng)知識(shí)的理解能力及在較復(fù)雜情景中綜合運(yùn)用相應(yīng)知識(shí)進(jìn)行分析、判斷、推理和評(píng)價(jià)的能力．